【目的】探索MAR调控序列对外源人抑癌基因p53在转基因鸡体内整合稳定性的影响，为转基因禽类输卵管生物反应器的建立奠定基础。【方法】利用脂质体包埋法，将pEGFP-N1-p53/MAR重组真核表达载体转染人肝癌细胞（Hep3B），荧光显微镜和透射电镜检测转染含人野生型p53基因的Hep3B细胞形态及超微观结构的变化情况；显微注射法将脂质体介导的重组载体注入鸡X期胚盘的明区和暗区，制备G0代转基因鸡。以EGFP为报告基因，人工授精法制备G1代转基因鸡，对G0代和G1代鸡体外源基因p53进行PCR检测，并对G1代转基因鸡进行小动物活体成像检测。【结果】转染含人p53基因重组载体的Hep3B细胞明显皱缩变圆；微观结构层面，粗面内质网不明显，线粒体肿胀，细胞核中异染色质边集明显，并出现凋亡小体。G0代转基因鸡暗区组孵化率（45%）显著高于明区组孵化率（0）（P<0.05），但均显著低于对照组孵化率（82.5%）（P<0.05）；获得4只基因组中含有外源p53基因的G0代转基因鸡，外源基因转染率为22.2%（4/18）；获得2只G1代转基因鸡，转基因世代遗传率为3.08%（2/65）。【结论】 重组真核表达载体pEGFP-N1-p53/MAR可以促进人肝癌细胞Hep3B的凋亡；脂质体介导的含MAR序列调控元件的pEGFP-N1-p53/MAR质粒，可以提高p53在转基因鸡基因组中的整合稳定性，并可遗传给后代。