pCMV—TNFα的构建及其在动物细胞中的表达

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：skyedge228

【摘要】

：

以ＸｂａＩ和ＥｃｏＲＶ双酶消化ｐＢＴ１获得肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）ｃＤＮＡ基因片段，以ＸｂａＩ和ＳｍａＩ酶切点定向克隆入质粒载体ｐＣＭＶ４，构建了人ＴＮＦα重组质粒ｐＣＭＶ－ＴＮＦα。采用ＤＮＡ－磷酸钙共沉淀法转染ＣＯＳ７和ＮＩＨ３Ｔ３细胞，收集转染后不同时间的细胞培养上清，检

【作者】

：

高荣凯黎诚耀

【机构】

：

长春农牧大学基础部

【出处】

：

中国兽医学报

【发表日期】

：

1995年1期

【关键词】

：

肿瘤坏死因子基因重组基因表达动物 tumor necrosis factorgene recombination gene expression

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以ＸｂａＩ和ＥｃｏＲＶ双酶消化ｐＢＴ１获得肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）ｃＤＮＡ基因片段，以ＸｂａＩ和ＳｍａＩ酶切点定向克隆入质粒载体ｐＣＭＶ４，构建了人ＴＮＦα重组质粒ｐＣＭＶ－ＴＮＦα。采用ＤＮＡ－磷酸钙共沉淀法转染ＣＯＳ７和ＮＩＨ３Ｔ３细胞，收集转染后不同时间的细胞培养上清，检测ＴＮＦα的表达水平和生物学活性。ＥＬＩＳＡ检测表明，两种细胞转染后，其培养上清中均有ＴＮＦα抗原存在，而载体等

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