虎杖ISSR—PCR反应体系的建立与优化

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采用SDS法和CTAB法提取虎杖的DNA,并比较两种方法的效果,通过单因子试验优化影响虎杖ISSR—PCR的主要参数。结果表明,CTAB法提取的虎杖.4-DNA质量优于SDS法。虎杖ISSR—PCR的最佳反应体系总体积为25μL,1xPCR reaction buffer[10mmol Tris—HCl(pH8-3),50mmolKCI],40ng模板DNA,0.25mmol·L^-1dNTPs,2UraqDNA聚合酶,2.0mmol·L^-1 MgCl2,1.0μmol·L
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