秦川牛ADIG基因重组腺病毒过表达载体的构建与病毒包装

来源 :西北农林科技大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pomerku
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【目的】构建秦川牛ADIG基因的重组腺病毒载体,包装并扩繁病毒,为下一步研究该基因在脂肪细胞分化过程中的分子作用机制和相关信号通路奠定基础。【方法】根据NCBI收录的家牛的ADIG基因(NM_001113720.1)mRNA序列设计引物,以秦川牛组织样提取的总RNA反转录而成的cDNA为模板,通过RTPCR和PCR扩增获得目的基因,将其连接pMD19T Simple载体并测序。质粒提取纯化后通过Bgl Ⅱ与SalⅠ双酶切,然后胶回收酶切产物,将其连接到穿梭载体pAdTrack/CMV上,构建重组穿梭质粒p
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