【摘 要】
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目的探讨蛋白激酶D(PKD)与鞘氨醇激酶2(SphK2)参与调控丁酸钠诱导的人肝癌HepG2细胞凋亡的分子机制。方法采用流式细胞仪检测不同浓度丁酸钠作用48 h后人肝癌HepG2细胞的凋亡
【机 构】
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广东医学院附属医院检验科; 南方医科大学公共卫生与热带医学学院毒理学系;
【基金项目】
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广东省自然科学基金(S2012010008922);广东医学院博士启动项目(B2012032)~~
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目的探讨蛋白激酶D(PKD)与鞘氨醇激酶2(SphK2)参与调控丁酸钠诱导的人肝癌HepG2细胞凋亡的分子机制。方法采用流式细胞仪检测不同浓度丁酸钠作用48 h后人肝癌HepG2细胞的凋亡率,以及干扰或过表达PKD或SphK2对丁酸钠诱导人肝癌HepG2细胞凋亡率的影响;并且在分别干扰PKD或SphK2后以免疫印迹法检测其对丁酸钠诱导另一蛋白激活(磷酸化)的影响。结果丁酸钠能明显诱导HepG2细胞凋亡(P<0.01),且具有浓度依赖性;而在PKD或SphK2被干扰后,丁酸钠诱导细胞凋亡率比未干扰细胞明显增高(P<0.01),而过表达PKD或SphK2的细胞在丁酸钠作用下其凋亡率比空质粒对照组细胞明显下降(P<0.01),并且干扰PKD可阻断丁酸钠诱导的SphK2激活(P<0.01),而干扰SphK2则对PKD的激活无影响(P<0.01)。结论 PKD和SphK2均可负性调控丁酸钠诱导的HepG2细胞凋亡。
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