【摘 要】
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目的 研究人羊膜上皮细胞（human amnioticepithelial cells，h AECs）旁分泌情况及其在糖尿病皮肤损伤大鼠模型中皮肤愈合及血管再生的作用。方法 采用流式细胞术对 h AECs 表型进
【机 构】
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老年性疾病干细胞技术国家地方联合工程研究中心;黑龙江天晴干细胞股份有限公司;哈尔滨富尔斯特生物工程有限责任公司;
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目的 研究人羊膜上皮细胞（human amnioticepithelial cells，h AECs）旁分泌情况及其在糖尿病皮肤损伤大鼠模型中皮肤愈合及血管再生的作用。方法 采用流式细胞术对 h AECs 表型进行分析；ELISA 方法检测 h AECs 培养上清中旁分泌因子含量；划痕试验检测 h AECs 条件培养基对人脐静脉血管内皮细胞（human umbilical veinendothelial cells，HUVECs）划痕的愈合作用，确定旁分泌作用对其迁移能力的影响；对糖尿病大鼠进行皮肤损伤造模，检测经 h AECs 治疗后，皮肤中 CD34 表达及 Cyclin D1 基因 m RNA 转录水平。结果 h AECs 表面高表达间充质干细胞表面标志 CD29、CD73、CD105 及胚胎干细胞表面标志 SSEA4，低表达间充质干细胞表面标志 CD44、CD90 及造血干细胞表面标志 CD45、CD34、HLA鄄DR；可大量分泌血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF），72 h时表达量显著高于 24 和 48 h 及培养基对照组（P< 0. 05）；HUVECs 划痕后 24 和 48 h，两种浓度条件培养基组对细胞的愈合作用均较基础培养基对照组强，差异有统计学意义（P< 0. 01），且两种浓度条件培养基组细胞迁移率差异无统计学意义（P> 0. 05）；h AECs 治疗后糖尿病大鼠皮肤中 CD34 表达及 Cyclin D1 基因 m RNA 转录水平均显著高于相同取材时间条件下的未治疗组，差异有统计学意义（P< 0. 05）。结论 h AECs 可大量分泌 VEGF，并能够通过旁分泌作用促进体外 HUVECs 迁移、增殖及糖尿病大鼠皮肤血管再生。关键词：人羊膜上皮细胞；旁分泌；糖尿病大鼠模型；皮肤损伤；血管再生
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