TGEV细胞培养物超速离心与RT—PCR扩增的研究

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【摘要】

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研究猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）细胞培养物的超速离心及鉴定方法。将TGEV的细胞培养物用饱和硫酸氨法浓缩后，用200g／kg-500g／kg蔗糖密度梯度离心分装，测定蛋白浓度并取峰值管进行RT-

【作者】

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蒋凤英何锡忠王英李春华钱永清邹勇

【机构】

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上海农科院畜牧兽医研究所

【出处】

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动物医学进展

【发表日期】

：

2007年4期

【关键词】

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猪传染性胃肠炎病毒蔗糖密度梯度离心 RT-PCR Transmissible gastroenteritis virus discontinuous sucr

【基金项目】

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士海农业“四新”技术推广项目[沪农科推字（2005）第2-2号]

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研究猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）细胞培养物的超速离心及鉴定方法。将TGEV的细胞培养物用饱和硫酸氨法浓缩后，用200g／kg-500g／kg蔗糖密度梯度离心分装，测定蛋白浓度并取峰值管进行RT-PCR，并设立15、25、35三个不同循环参数测定PCR产物volume值。结果表明，在35个循环条件下第14号样品PCR产物的volume值最大，表明该样品病毒核酸的含量最大，由此推算病毒粒子主要集中在360g／kg-380g／kg蔗糖区带处，这与理论值相符，证明猪传染性胃肠炎病毒经密度区带离心后，利用PCR产

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