论文部分内容阅读
作者单位：056000 河北省邯郸市人民医院
通讯作者：郭建政
【摘要】 目的 探讨血清对氧磷脂酶1活性与2型糖尿病血管并发症的关系。方法 以对氧磷为底物测定2型糖尿病各组患者及健康老年人血清对氧磷脂酶1活性。结果 2型糖尿病组与健康对照组血清对氧磷脂酶1活性差异有统计学意义（P<0.01）；2型糖尿病合并血管病变组与2型糖尿病组血清对氧磷脂酶1活性差异有统计学意义（P<0.01）。结论 对氧磷脂酶1活性在2型糖尿病及并发血管病变患者中均显著降低，提示对氧磷脂酶1活性的降低参与了糖尿病血管并发症的发生。
【关键词】 对氧磷脂酶1； 糖尿病； 2型糖尿病； 糖尿病血管病变
A study on the relationship between paraoxonase 1 and type 2 diabetes mellitus with vascular complications GUO Jian-zheng. Handan Peoples Hospital, Handan 056000, China
【Abstract】 Objective To study the relationship between serum paraoxonase 1(PON1) activity and type 2 diabetes mellitus with vascular complications in the elderly．Methods Serum PON1 activity was measured by using paraoxonase as the substrate among the elderly with type 2 diasetes and the normal healthy people.Results PON1 activity was much lower in the elderly groups with type 2 diabetes mellitus than that of the controls, and PON1 activity was much lower in type 2 diabetic patients combined with macroangiopathy and microangiopathy than that of the simple type 2 diabetic patients (P<0.01). Serum PON1 activity was much lower in the elderly patients with type 2 diabetes mellitus and diabetic vascular complications.Conclusion The lower serum PON1 activity may play a role in elderly patients with type 2 diabetes mellitus and diabetic vascular complications．
【Key words】 Paraoxonase 1; Diabetes mellitus; Type 2 diabetes; Diabetic angiopathies
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2012.06.002
对氧磷脂酶（Paraoxonase, PON）于1953年被发现，因能水解神经毒杀虫剂对氧磷（Paraoxon）而命名为对氧磷脂酶。PON1是PON的同工酶，90年代初发现血清PON1活性与动脉粥样硬化的发生有密切关系。本研究观察PON1活性与老年人2型糖尿病的关系。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择2009年10月～2010年3月笔者所在医院2型糖尿病患者108例，符合WHO（1999年）的DM诊断标准［1］。其中男49例，女59例，年龄60～81岁，平均（66.81±4.59）岁，病程（8.60±5.01）年。根据有无DM并发症分为三组：2型糖尿病组29例，DM并心脑病变组37例，DM并肾脏病变组42例。心脑血管病变确定依据为有下列情况之一者：曾有心绞痛或心肌梗死病史或经心电图、超声心动图、Holter证实为冠心病者；有脑血管意外病史，颅脑CT或MRI扫描有缺血性或出血性病灶。糖尿病肾病的确诊依据Mogensen等［2］的诊断标准。
健康对照组为体检健康的老年人50例，其中男22例，女28例，年龄60～79岁，平均（66.02±4.37）岁。符合1995年中华医学会老年医学学会推荐的健康老年人标准［3］。健康对照组与DM各组在性别、年龄等方面具有可比性。
1.2 研究方法 各组患者测身高、体重，计算体重指数（BMI）=体重（kg）/身高2（m2）。甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL-C）用酶法测定，低密度脂蛋白（LDL-C）按Friedewald公式计算。空腹血糖（FBG）用葡萄糖氧化酶法测定。
PON 1活性测定［4］，空腹取血，离心分离血清，-20 ℃保存，以对氧磷为底物（paraoxonase），3周内同批测定。用血清10 μl、对氧磷应用液0.4 ml、甘氨酸缓冲液1.2 ml、0.1 MEDTA在25 ℃分别配制对照管和PON 1活性管。准备完毕后置于5 ml比色杯中，412 μm波长处，以水为参比，读取吸光度A值。由光密度换算为活性单位。PON 1活性管A1与对照管A0差值查标准曲线得血清PON 1活性单位。酶活性在0～1600单位内与吸光度值呈线性。以每分钟每升血清水解生成对硝基酚1 μmol为1个国际单位（IU/L）。
1.3 统计学处理 采用SPSS 10.0统计软件包进行多样本两两比较q检验、单因素方差分析，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 各组一般情况及FBG、血脂测定结果 DM各组患者与健康对照组FBG均值间差异有统计学意义（P<0.01）；DM各组与健康对照组及DM各组间TC均值间差异均有统计学意义（P<0.01）；DM并心脑病变组、DM并肾脏病变组与健康对照组TG、TC、LDL、HDL的均值间差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。见表1、2。
2.2 PON1活性、PON1/HDL-C活性 健康对照组与DM各组患者PON1活性及PON1/HDL-C间差异均有统计学意义（P<0.01）。见表3、4。
3 讨论
PON1是一类钙离子依赖的与高密度脂蛋白相关性芳香酯酶，PON1与高密度脂蛋白（HDL）紧密结合，通过水解脂质过氧化物，保护HDL与LDL免受氧化修饰［5］。90年代初发现，动脉粥样硬化、高脂血症和2型糖尿病患者PON1活性显著下降［6］。本研究显示，2型糖尿病患者PON1活性显著下降，且合并心脑血管病变、肾脏病变者其PON1活性更低。为避免HDL浓度影响，采用PON1/HDL-C比值来标化，该值也显著下降，提示PON1活性的减低参与了2型糖尿病心脑血管病变、肾脏病变的发生。
2型糖尿病患者长期处于高血糖状态，血中糖基化水平较高，PON1与HDL结合部位被不断糖基化修饰，必然影响该位点的构型，进而降低PON1活性。同时体内LDL被糖基化，使2型糖尿病患者体内ox-LDL明显增多［7］。不断增加的高浓度ox-LDL可以灭活部分PON1活性［8］。
尽管在糖尿病状态下多种机制使血管损伤，导致并加速动脉粥样硬化的发生、发展，引起心、脑、肾血管并发症，但其中更为重要的危险因素无疑是糖尿病时存在的血脂异常。糖尿病时血脂异常的特点常见为血中TG升高、LDL升高、HDL降低。而PON1活性降低正是涉及上述3个环节中的2个环节，即PON1活性降低使过氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）增加，使HDL减少。因此，PON1活性减低是2型糖尿病血管并发症的危险因素之一。能否通过提高PON1活性来改善脂代谢异常、动脉粥样硬化有待今后进一步研究。
参 考 文 献
［1］ 钱荣立.关于糖尿病的新诊断标准与分型［J］.中国糖尿病杂志,2000,8(1):5.
［2］ Mogensen CE. Manangement of early nephropaphy in diabetic patients［J］. Annu Rev Med,1995,7(2):46-79.
［3］ 中华医学会老年医学学会.中华医学会老年医学学会对健康老年人标准的建议（修订草案，1995年）［J］.中华老年医学杂志,1996,15(1):9.
［4］ 周志俊,邬红梅,胡云平,等.血清对氧磷脂酶活性测定方法研究［J］.中国公共卫生,2000,16(4):303-304.
［5］ Topcuoglu A, Uzun H, Aydin S, et al. The effect of hormone replacement therapy on oxidized low density lipoprotein levels and paraoxonase activity in postmenopausal women［J］. Tohoku J Exp Med,2005,205(1):79-86.
［6］ 原淑鸿,杨玉恒,夏岳.对氧磷酸酯酶1与动脉粥样硬化［J］．河北医药,2004,26(3):271.
［7］ 尹建丽,孙亚威,仇玉明,等.对氧磷脂酶1与2型糖尿病并发冠心病相关因素分析［J］.中国全科医学,2004,7(16):1129-1131.
［8］ Aviram M, Rosenblat M, Billecke S,et al. Human serum paraoxonase(PON1) is inactivated by oxidized low density lipoprotein and preserved by antioxidants［J］. Free Radic Bio Med,1999,26:892-904.
（收稿日期：2011-12-26）
（本文编辑：王宇）
通讯作者：郭建政
【摘要】 目的 探讨血清对氧磷脂酶1活性与2型糖尿病血管并发症的关系。方法 以对氧磷为底物测定2型糖尿病各组患者及健康老年人血清对氧磷脂酶1活性。结果 2型糖尿病组与健康对照组血清对氧磷脂酶1活性差异有统计学意义（P<0.01）；2型糖尿病合并血管病变组与2型糖尿病组血清对氧磷脂酶1活性差异有统计学意义（P<0.01）。结论 对氧磷脂酶1活性在2型糖尿病及并发血管病变患者中均显著降低，提示对氧磷脂酶1活性的降低参与了糖尿病血管并发症的发生。
【关键词】 对氧磷脂酶1； 糖尿病； 2型糖尿病； 糖尿病血管病变
A study on the relationship between paraoxonase 1 and type 2 diabetes mellitus with vascular complications GUO Jian-zheng. Handan Peoples Hospital, Handan 056000, China
【Abstract】 Objective To study the relationship between serum paraoxonase 1(PON1) activity and type 2 diabetes mellitus with vascular complications in the elderly．Methods Serum PON1 activity was measured by using paraoxonase as the substrate among the elderly with type 2 diasetes and the normal healthy people.Results PON1 activity was much lower in the elderly groups with type 2 diabetes mellitus than that of the controls, and PON1 activity was much lower in type 2 diabetic patients combined with macroangiopathy and microangiopathy than that of the simple type 2 diabetic patients (P<0.01). Serum PON1 activity was much lower in the elderly patients with type 2 diabetes mellitus and diabetic vascular complications.Conclusion The lower serum PON1 activity may play a role in elderly patients with type 2 diabetes mellitus and diabetic vascular complications．
【Key words】 Paraoxonase 1; Diabetes mellitus; Type 2 diabetes; Diabetic angiopathies
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2012.06.002
对氧磷脂酶（Paraoxonase, PON）于1953年被发现，因能水解神经毒杀虫剂对氧磷（Paraoxon）而命名为对氧磷脂酶。PON1是PON的同工酶，90年代初发现血清PON1活性与动脉粥样硬化的发生有密切关系。本研究观察PON1活性与老年人2型糖尿病的关系。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择2009年10月～2010年3月笔者所在医院2型糖尿病患者108例，符合WHO（1999年）的DM诊断标准［1］。其中男49例，女59例，年龄60～81岁，平均（66.81±4.59）岁，病程（8.60±5.01）年。根据有无DM并发症分为三组：2型糖尿病组29例，DM并心脑病变组37例，DM并肾脏病变组42例。心脑血管病变确定依据为有下列情况之一者：曾有心绞痛或心肌梗死病史或经心电图、超声心动图、Holter证实为冠心病者；有脑血管意外病史，颅脑CT或MRI扫描有缺血性或出血性病灶。糖尿病肾病的确诊依据Mogensen等［2］的诊断标准。
健康对照组为体检健康的老年人50例，其中男22例，女28例，年龄60～79岁，平均（66.02±4.37）岁。符合1995年中华医学会老年医学学会推荐的健康老年人标准［3］。健康对照组与DM各组在性别、年龄等方面具有可比性。
1.2 研究方法 各组患者测身高、体重，计算体重指数（BMI）=体重（kg）/身高2（m2）。甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL-C）用酶法测定，低密度脂蛋白（LDL-C）按Friedewald公式计算。空腹血糖（FBG）用葡萄糖氧化酶法测定。
PON 1活性测定［4］，空腹取血，离心分离血清，-20 ℃保存，以对氧磷为底物（paraoxonase），3周内同批测定。用血清10 μl、对氧磷应用液0.4 ml、甘氨酸缓冲液1.2 ml、0.1 MEDTA在25 ℃分别配制对照管和PON 1活性管。准备完毕后置于5 ml比色杯中，412 μm波长处，以水为参比，读取吸光度A值。由光密度换算为活性单位。PON 1活性管A1与对照管A0差值查标准曲线得血清PON 1活性单位。酶活性在0～1600单位内与吸光度值呈线性。以每分钟每升血清水解生成对硝基酚1 μmol为1个国际单位（IU/L）。
1.3 统计学处理 采用SPSS 10.0统计软件包进行多样本两两比较q检验、单因素方差分析，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 各组一般情况及FBG、血脂测定结果 DM各组患者与健康对照组FBG均值间差异有统计学意义（P<0.01）；DM各组与健康对照组及DM各组间TC均值间差异均有统计学意义（P<0.01）；DM并心脑病变组、DM并肾脏病变组与健康对照组TG、TC、LDL、HDL的均值间差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。见表1、2。
2.2 PON1活性、PON1/HDL-C活性 健康对照组与DM各组患者PON1活性及PON1/HDL-C间差异均有统计学意义（P<0.01）。见表3、4。
3 讨论
PON1是一类钙离子依赖的与高密度脂蛋白相关性芳香酯酶，PON1与高密度脂蛋白（HDL）紧密结合，通过水解脂质过氧化物，保护HDL与LDL免受氧化修饰［5］。90年代初发现，动脉粥样硬化、高脂血症和2型糖尿病患者PON1活性显著下降［6］。本研究显示，2型糖尿病患者PON1活性显著下降，且合并心脑血管病变、肾脏病变者其PON1活性更低。为避免HDL浓度影响，采用PON1/HDL-C比值来标化，该值也显著下降，提示PON1活性的减低参与了2型糖尿病心脑血管病变、肾脏病变的发生。
2型糖尿病患者长期处于高血糖状态，血中糖基化水平较高，PON1与HDL结合部位被不断糖基化修饰，必然影响该位点的构型，进而降低PON1活性。同时体内LDL被糖基化，使2型糖尿病患者体内ox-LDL明显增多［7］。不断增加的高浓度ox-LDL可以灭活部分PON1活性［8］。
尽管在糖尿病状态下多种机制使血管损伤，导致并加速动脉粥样硬化的发生、发展，引起心、脑、肾血管并发症，但其中更为重要的危险因素无疑是糖尿病时存在的血脂异常。糖尿病时血脂异常的特点常见为血中TG升高、LDL升高、HDL降低。而PON1活性降低正是涉及上述3个环节中的2个环节，即PON1活性降低使过氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）增加，使HDL减少。因此，PON1活性减低是2型糖尿病血管并发症的危险因素之一。能否通过提高PON1活性来改善脂代谢异常、动脉粥样硬化有待今后进一步研究。
参 考 文 献
［1］ 钱荣立.关于糖尿病的新诊断标准与分型［J］.中国糖尿病杂志,2000,8(1):5.
［2］ Mogensen CE. Manangement of early nephropaphy in diabetic patients［J］. Annu Rev Med,1995,7(2):46-79.
［3］ 中华医学会老年医学学会.中华医学会老年医学学会对健康老年人标准的建议（修订草案，1995年）［J］.中华老年医学杂志,1996,15(1):9.
［4］ 周志俊,邬红梅,胡云平,等.血清对氧磷脂酶活性测定方法研究［J］.中国公共卫生,2000,16(4):303-304.
［5］ Topcuoglu A, Uzun H, Aydin S, et al. The effect of hormone replacement therapy on oxidized low density lipoprotein levels and paraoxonase activity in postmenopausal women［J］. Tohoku J Exp Med,2005,205(1):79-86.
［6］ 原淑鸿,杨玉恒,夏岳.对氧磷酸酯酶1与动脉粥样硬化［J］．河北医药,2004,26(3):271.
［7］ 尹建丽,孙亚威,仇玉明,等.对氧磷脂酶1与2型糖尿病并发冠心病相关因素分析［J］.中国全科医学,2004,7(16):1129-1131.
［8］ Aviram M, Rosenblat M, Billecke S,et al. Human serum paraoxonase(PON1) is inactivated by oxidized low density lipoprotein and preserved by antioxidants［J］. Free Radic Bio Med,1999,26:892-904.
（收稿日期：2011-12-26）
（本文编辑：王宇）