大豆翻译起始因子4E 干扰片段克隆及其 RNAi载体构建

来源 :华北农学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zx1q1q1

【摘要】

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应用基于RNA干扰（ RNA interference，RNAi）原理的大豆转基因技术，能够在转录水平沉默同源靶基因，这为转基因抗病毒作物的培育提供了新的策略。通过比对已报道的能与病毒VPg发生互

【作者】

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高乐翟锐丁雪妮李凯章红运王涛智海剑

【机构】

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作物遗传与种质创新国家重点实验室、南京农业大学国家大豆改良中心、农业部大豆生物学与遗传育种重点实验室

【出处】

：

华北农学报

【发表日期】

：

2014年4期

【关键词】

：

大豆花叶病毒 eIF4E基因 RNA干扰 GATEWAY技术载体构建 Soybean mosaic viruseIF4E geneRNA interferen

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应用基于RNA干扰（ RNA interference，RNAi）原理的大豆转基因技术，能够在转录水平沉默同源靶基因，这为转基因抗病毒作物的培育提供了新的策略。通过比对已报道的能与病毒VPg发生互作的10种植物的eIF4E氨基酸序列，确定出大豆eIF4E的保守区间为62～237位氨基酸序列，克隆出406 bp的干扰片段eIF4Ei（含58 bp特异性重组序列attB），进而采用GATEWAY技术构建了干扰表达载体pB7GWIWG2（Ⅱ）-eIF4Ei。之后通过测序证实干扰片段eIF4Ei在载体构建过程中没

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