【摘 要】
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目的:研究老年人睾丸组织基因表达谱变化,为研究老年人睾丸功能衰退机制奠定基础.方法:知情同意下获取正常青年人和老年人睾丸组织标本各3例,采用QIAGEN RNA提取试剂盒提取总
【机 构】
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北京大学第一医院泌尿外科,Kouppy Urology Laboratory of UCSF
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目的:研究老年人睾丸组织基因表达谱变化,为研究老年人睾丸功能衰退机制奠定基础.方法:知情同意下获取正常青年人和老年人睾丸组织标本各3例,采用QIAGEN RNA提取试剂盒提取总RNA,分别等量混合后制备探针.利用ClonTech公司生产的包含8 000个已知基因的人类cDNA基因芯片[Atlas Plastic Human 8K Microarray (Cat.#7905-1)]筛选差异表达基因.按基因功能分类方法对老年睾丸组织中差异表达的基因进行归类分析.用RT-PCR、T-A克隆测序等方法选择目的基因,验证基因芯片结果.结果:筛选到差异表达基因117个(1.46%),83个基因在老年睾丸组织中表达下调,34个基因表达上调.在表达下调的基因中,代谢相关基因16个(19.3%),与基因和蛋白表达相关的基因18个(21.7% ),信号通路相关基因16个( 19.3% ),细胞分化相关基因19个(22.9%),细胞结构和运动相关基因6个(7.2%),细胞或内环境稳态相关基因4个(4.8%),未知功能基因4个(4.8%).在表达上调的基因中,代谢相关基因3个(8.8%),与基因和蛋白表达相关的基因10个(29.4% ),信号通路相关基因2个(5.9%),细胞分化相关基因11个(32.4%),细胞结构和运动相关基因8个(23.5%).RT-PCR及T-A克隆测序进一步证实呼吸链相关的基因cox7a2在老年睾丸组织显著上调,atp50显著下调.结论:老年人的睾丸组织中基因表达谱发生了明显变化,老年人睾丸功能衰退与多种基因表达变化有关,其中呼吸链功能相关cox7a2、atp50基因的显著差异表达可作为重要目的基因,可能对进一步研究睾丸功能衰退的机制具有重要意义.
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