猪卵透明带-4蛋白在大肠杆菌中高表达的研究

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目的:在大肠杆菌中高水平地直接表达目的蛋白。方法:用PCR方法从猪卵透明带-l(pZP1)cDNA中扩增pZP4目的基因片段,通过在其5’端和3’端引入的双酶切位点将该完整的目的cDNA定向插入pBV221表达质粒PRPL启动因子下游的多克隆区。结果:此重组表达质粒转化宿主工程菌后经热诱导培养,可在SDS-PAGE凝胶上得到特异性的高表达蛋白条带,而且它在 Wistem blot鉴定实验中能被鼠抗pZP4的单克隆抗体17D3和兔抗pZPIgGe识别。结论:成功地在大肠杆菌高效表达了可被17D3单克隆抗体及ZP多克隆抗体识别的ZP4。
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