离心参数对流式分选后样本的影响研究

来源 :中国细胞生物学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nwhitewolf
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流式分选术是对细胞或生物颗粒进行无菌筛分的技术,因具有检测速度快、通量高、灵敏度高等优势,故在医学及生命科学领域有广阔的应用前景.离心是流式分选后富集细胞的常用技术,直接影响流式分选后样本的细胞活性和得率.该文以KPC细胞系(即小鼠胰腺组织特异性kras缺失p53突变形成胰腺癌分离的癌细胞,简称KPC)和小鼠原代脾脏细胞为例,利用FACS SORP Aria Ⅱ分选仪进行分选.对离心力、离心时间等参数进行优化,结果表明KPC细胞分选后,300 ×g、4℃离心25 min,能获得高得率高活性的细胞用于下游实验,而小鼠原代脾脏细胞则300 ×g、4℃离心15 min最为合适.该方法解决了流式分选后细胞离心难、离心损失大的问题,可提高分选实验实际得率,为流式分选术的应用提供技术参考.
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代谢重编程是肿瘤细胞的主要特征.除了我们熟知的Warburg效应外,氨基酸及代谢产物影响肿瘤的发生发展,改变肿瘤微环境,在免疫应答及调节免疫细胞功能中的作用愈发明显,参与获得性及先天性免疫调节,因此氨基酸代谢受到越来越多的关注.肿瘤免疫治疗通过靶向特定分子及异常代谢过程,改变肿瘤微环境,协助自身免疫系统杀伤肿瘤细胞.氨基酸代谢能从信号转导、肿瘤炎性环境、新生血管生成、肿瘤细胞侵袭和转移等方面参与调节肿瘤微环境及抗肿瘤免疫应答,因此是肿瘤免疫治疗中重要的干预靶点.该丈主要综述了近几年氨基酸代谢重编程在肿瘤发