人端粒酶逆转录酶慢病毒载体的构建及人肝细胞的初步筛选

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：q329118794

【摘要】

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目的：构建人端粒酶逆转录酶（hTERT）慢病毒表达载体，将其转染人肝细胞L02并且通过杀稻瘟筛选出阳性克隆细胞。方法：以PBABE-puro-hTERT质粒为模板PCR法获取目的基因attB1-hTERT-att

【作者】

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梁旭竞陈小佳金玲李丽玲汤绍辉陈友鹏杨冬华

【机构】

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暨南大学附属第一医院消化科,暨南大学生物工程研究所,暨南大学附属第一医院眼科,暨南大学附属第一医院感染科

【出处】

：

中国病理生理杂志

【发表日期】

：

2009年4期

【关键词】

：

端粒酶逆转录酶慢病毒载体肝细胞 Telomerase reverse transcriptase Lentiviral vector Hepatocyt

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目的：构建人端粒酶逆转录酶（hTERT）慢病毒表达载体，将其转染人肝细胞L02并且通过杀稻瘟筛选出阳性克隆细胞。方法：以PBABE-puro-hTERT质粒为模板PCR法获取目的基因attB1-hTERT-attB2，通过BP反应克隆至pDONR221；采用LR重组酶将pDONR221-hTERT和pLenti6／V5-DEST进行重组反应，形成pLenti6／V5-DEST-hTERT。将重组载体pLenti6／V5-DEST-hTERT与包装质粒充分混合，利用脂质体共转染293~q＂细胞，获得重组慢病

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