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目的
探讨白细胞介素1β(IL–1β)促进胃癌细胞生长的机制。
方法采用芯片筛选IL–1β处理后人胃癌细胞系(AGS)细胞中差异表达的miRNAs；应用生物信息学手段及双荧光素酶报告系统筛选并验证miR–425的靶基因；CCK–8检测细胞增殖率；流式细胞仪检测细胞的凋亡；实时聚合酶链反应(Real–time PCR)检测临床样本及细胞中miR–425的表达。
结果(1)IL–1β处理AGS细胞后，29个miRNAs表达上调，17个miRNAs表达下调。其中miR–425在IL–1β处理后表达上调最明显。Real–time PCR结果显示，相比癌旁组织，miR–425在胃癌组织中表达显著上调(均值1.41与5.81，P<0.000 1)；(2)使用生物信息学方法miRecords预测miR–425的潜在靶基因，经双荧光素酶报告检测，证实PTEN是miR–425的直接靶标；(3)使用核因子(NF)–κB单克隆抗体对AGS细胞行染色质免疫沉淀，证实NF–κB蛋白与miR–425的启动子中形成了复合物。荧光素酶报告基因的结果显示：miR–425启动子上B结合位点是IL–1β诱导miR–425转录激活必需的；(4)IL–1β诱导的miR–425表达上调促进细胞的增殖，抑制细胞凋亡。
结论IL–1β通过激活NF–κB诱导miR–425表达上调，负性调控PTEN进而促进胃癌细胞的增殖和抗凋亡作用。