【摘 要】
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目的 探讨Bcl-XL小分子干扰RNA(siRNA)在逆转人结肠癌细胞获得性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)耐药中的作用.方法 以Bcl-XL siRNA转染获得性TRAIL耐药的人结肠癌DLD
【机 构】
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浙江大学医学院附属邵逸夫医院肛肠外科生物医学研究中心,南京军区杭州疗养院空勤疗养区
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目的 探讨Bcl-XL小分子干扰RNA(siRNA)在逆转人结肠癌细胞获得性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)耐药中的作用.方法 以Bcl-XL siRNA转染获得性TRAIL耐药的人结肠癌DLD1-TRAIL/R细胞24 h,并用TRAIL蛋白处理,通过细胞计数和流式细胞仪检测细胞的存活率,并通过Western blot法检测各种凋亡相关蛋白的活化情况.结果Bcl-XL siRNA能有效下调DLD1-TRAIL/R细胞中Bcl-XL蛋白的表达水平,并且能够有效地逆转其对TRAIL蛋白的耐药.DLD1-TRAIL/R细胞经过Bcl-XL siRNA和TRAIL蛋白共同处理2 h后,其细胞凋亡率＞50%;共同处理4 h后,其细胞存活率＜40%;而对照组和TRAIL蛋白处理组的细胞凋亡率和生存率无明显变化(P＜0·05).Western blot法检测结果表明,经Bcl-XL siRNA与TRAIL蛋白联合处理后,DLD1TRAIL/R细胞中caspase-8、caspase-9、Bid、caspase-3以及多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(PARP)均明显活化,细胞色素C的释放显著增加.结论 Bcl-XL siRNA能够有效逆转结肠癌细胞获得性TRAIL耐药,这将为治疗肿瘤耐药提供一种新的思路.
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