猪生殖和呼吸综合征的检疫与诊断

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  摘 要 猪生殖和呼吸综合征(PRRS)俗称蓝耳病,它以妊娠母猪的流产、死胎、木乃伊胎等繁殖障碍为主,并且基于PRRS病毒所引发的各年龄段仔猪呼吸道疾病。目前,PRRS已经成为规模化养猪场的主要疫病之一,严重时会给地方养猪行业带来巨大经济损失。介绍猪生殖和呼吸综合征的发病状况、发病症状及诊断方法。
  关键词 猪生殖和呼吸综合征(PRRS);发病症状;检疫;诊断;防治措施
  中图分类号:S858.28 文献标志码:B DOI:10.19415/j.cnki.1673-890x.2017.16.028
  猪生殖和呼吸综合征(PRRS)是由猪生殖和呼吸综合征病毒引起的一种以妊娠母猪严重生殖障碍以及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征的传染病。目前,PRRS逐渐成为规模化养猪场的主要疫病之一,严重时会给地方养猪行业带来巨大经济损失。经过多年的检疫实践,对猪生殖和呼吸综合征的检验检疫积累了一定经验。介绍猪生殖和呼吸综合征的发病状况、发病症状及诊断方法,以为有效预防控制PRRS提供参考。
  1 PRRS的发病状况及症状分析
  1.1 PRRS的发病状况
  规模化养猪场中生猪容易大规模感染猪生殖和呼吸综合征,仔猪死亡率高,会给养猪场造成巨大经济损失。
  当规模化养猪场有生猪感染PRRS后,被感染的临产母猪会出现厌食,这种状况会持续3~6 d,有的甚至会长达10~20 d。这些厌食母猪分娩后少奶甚至不产奶,导致无法顺利哺乳仔猪,而厌食母猪本身发热症状并不明显,很难通过它们的体温(38.4~39.7℃)来诊断病情。
  第二阶段(1月后),当进行猪瘟疫苗接种时,可能会出现猪身大面积发热状况,病猪最高体温可以达到42℃以上。随后许多母猪都会出现流产或配种母猪发情等异常状况。再经过15 d就会出现大量腹泻仔猪,仔猪死亡数开始呈现明显上升趋势。
  第三阶段,规模化养猪场内所有猪均出现发热症状,其中大部分病猪会出现皮肤发红,如果按照弓形虫病及附红细胞体病治疗会显示治疗无效,将某些病亡猪体解剖会发现,它们发生了非典型猪瘟病变,正是这种猪瘟病变迅速蔓延至整个猪场,病猪不但皮肤发红,还存在呼吸急促、精液稀薄、哺乳仔猪及断奶仔猪感染多种疾病等现象,死亡率不断飙升。此时可以对病猪血液采样进行PPRS抗体检测,通常PRRS免疫抗体成阳性,阳性率超过87%。
  通常来讲,PRRS疫情高峰从7月开始,到8—9月进入发病最高峰时期,主要症状为妊娠母猪会出现大面积流产,哺乳仔猪与断奶仔猪则会出现呼吸困难症状且会持续较长时间,死亡率高,给养猪场造成严重损失。
  1.2 症状分析
  除妊娠母猪会出现厌食、发热、皮肤发红、断奶等症状以外,病猪的咳嗽频率加快,个别病猪会出现少量黏性鼻液,大部分病猪会出现双耳发蓝或发紫现象,这就是俗称的“蓝耳病”。感染PRRS的病程较短,一般为10~15 d,其中重度感染病猪可能会立刻死亡,一般以继发感染病猪死亡率最高。部分肥育猪群会呈现一过性厌食状态,发热症状几天后消除,一周之内就会康复。正在哺乳期的仔猪,不同日龄发病均可发病,症状以发热为主,会突然发热且呼吸急促。
  PRRS的发病顺序通常为妊娠母猪先发热,然后仔猪才发热,发病期间大部分仔猪都会由于继发感染而死亡,甚至出现整窝死亡现象,有些仔猪虽然没有死亡,但可能会出现后肢瘫痪或痉挛等运动障碍[1]。感染此病后,养殖户需要根据母猪的实际发病情况进行诊断,及时发现母猪的生殖障碍问题,采取有效防治措施,减少经济损失。
  2 PRRS的检疫与诊断
  2.1 检疫试验分析
  PRRS的诊断方法有多种。依据临床症状和病理变化只可做初步诊断,确诊必须依靠实验室检查。目前应用较广的实验室诊断技术有病毒的分离与鉴定、免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)、间接免疫荧光试验(IFA)、间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和血清中和试验等。
  病毒的分离与鉴定,主要基于Marc145和HS2H细胞长时间培养(48~72 h)后利用无水乙醇进行固定,并配合PRRS毒株抗血清做IFA,基于不同毒株抗血清滴度来区分标准毒株与阴性血清,区分正常细胞与非正常细胞,最后进行PBS对照。首先对PRRS病毒及其抗血清进行培养,将病毒接种在长满单层的Marc145和HS2H细胞上进行繁殖,培养温度设定在37℃左右,持续培养48~72 h,观察致细胞病变作用(CPE),出现典型CPE时即可收获,收获后低温保存以备用。Marc145和HS2H细胞主要利用含10%犊牛血清的MEM生长液进行培养。
  IFA试验可将流产胎儿、已死亡仔猪的内脏(肝脏、心脏、脾脏、肾脏、肺等)完全剪碎研磨,也可选用分離出的病料,在其中加入双抗,再制成1∶10悬液后进行离心处理,最后利用微孔滤膜除菌装置进行除菌处理,放置于-(25~20)℃冰箱中保存备用。IFA試验要将培养板中的乙醇移出,并配合PRRS毒株在细胞培养皿进行培养,培养温度为37℃,培养时间为45 min。弃去板中液体,用PBS液洗1~2 min,连续洗3次,最后用PBS液作20倍稀释被检血清。被检血清样品出现特异性胞浆亮绿色荧光判为阳性,否则,判为阴性。
  2.2 诊断结果分析
  通过上述试验检查结果得出结论,规模化养猪场PRRS病发并流行以后,多头生猪抗体呈现阳性。当临床上怀疑有PRRS病毒感染时,可根据实际情况,选用一种或两种方法进行确诊。对于未接种过PRRS疫苗或已超疫苗免疫期的猪,任何方法检测呈阳性时,可判定为PRRS病毒感染猪。对接种过PRRS灭活疫苗并在疫苗免疫期内的猪,当病毒分离鉴定试验为阳性时,可终判为PRRS病毒感染猪;当仅血清学试验呈阳性时,应结合病史和疫苗接种史进行综合判定。
  3 PRRS的防治措施   为预防PRRS病发,应该对生长肥育猪群进行PRRS疫苗接种,以便有效预防PRRS病毒蔓延。做好消毒工作,对于已经出现PRRS病状的区域,进行彻底消毒,可以利用生石灰进行消毒处理,也可以利用红外线消毒方式。如果存在其他继发感染,则要对症进行疫苗接种与药物治疗。如果是哺乳仔猪或断奶仔猪发病,则同样适用PRRS疫苗来进行免疫接种,断奶仔猪的控制效果可能比哺乳仔豬要更差,具体情况根据猪的发病程度来判断。如果是种猪发病,在第一时间接种PRRS疫苗后,还要有效控制种猪的繁殖障碍,适当增加种猪的免疫接种次数,能有效提高预防效果[2]。
  4 小结
  1)一般来说,规模化养猪场感染PRRS后,妊娠母猪不会出现严重发热症状,皮肤会轻微发红,但是其继发感染严重且状况复杂,很可能造成大面积仔猪和种猪被感染,导致生殖障碍与呼吸综合征的发生。
  2)某些猪群存在一过性病发状况,病猪不发热,皮肤也不会发红,死亡率低,此状况可能是由猪瘟继发感染所致,它虽然不会导致猪死亡,但可能造成猪抵抗力下降,需要对这部分猪群多加注意和看护治疗。同时,进行全面檢查,及时发现母猪身体中存在的病毒组织,诊断治疗,在最短时间内减少对母猪的损害,以减少养殖户的经济损失。
  3)要针对猪PRRS病原体进行病原分离,检查出猪瘟病变的明显病料,然后基于病料进行检疫试验,制作IFA,从试验过程中来进一步明确PRRS病发症状,完成检疫过程[3]。
  4)需要做好消毒工作,对于已经出现PRRS病状的区域,进行彻底消毒,可以利用生石灰进行消毒处理,也可以利用红外线消毒方式。
  只有这样,才能控制猪PRRS病毒蔓延扩展。
  参考文献∶
  [1] 梁海霞,薛青红,高金源,等.高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒NASBA-ELISA检测方法的建立[J].中国兽医科学,2009,39(5):401-404.
  [2] 马德慧,马国文,丁英,等.猪生殖与呼吸综合征病理损害与免疫抑制观察[J].中国兽医科学,2001,31(6):15-16.
  [3] 花象柏.江西省猪生殖和呼吸系统综合征的初步诊断[J].中国兽医科学,2002,32(9):38-39.
  (助理编辑∶易 婧;责任编辑∶丁志祥)
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