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[目的]探讨影响大叶栎ISSR扩增效果的因素，建立大叶栎ISSR扩增的优化体系。[方法]以新嫩的大叶栎叶片为试材，采用改良CTAB法提取大叶栎叶片基因组DNA，并将DNA浓度稀释到30ng／μl，采用单因素试验设计测试DNA模板、PCR缓冲液和TaqDNA聚合酶的用量以及底物dNTP终浓度和引物终浓度对ISSR扩增的影响。[结果]大叶栎的ISSR扩增的最优反应体系为：总体积20μl中含有DNA模板60ng、PCR缓冲液10×buffer为2．0μl，底物dNTP终浓度为0．25mmol／L，引物