稳定表达组织型纤溶酶原激活因子基因的人脐静脉内皮细胞株的建立

来源 :生物医学工程学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：guanghui_715

【摘要】

：

为建立稳定表达组织型纤溶酶原激活因子（t-PA）基因的人脐静脉内皮细胞株，为其在基因修饰的组织工程血管中的应用奠定基础。首先构建t-PA基因的真核表达载体pcDNA3．1-Myc-HisB（-）／t-P

【作者】

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刘小斌张凯伦蒋雄刚王家宁黄永章

【机构】

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贵州省人民医院心外科,华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管外科,湖北郧阳医学院临床医学研究所

【出处】

：

生物医学工程学杂志

【发表日期】

：

2007年6期

【关键词】

：

血管组织工程组织型纤溶酶原激活因子阳离子脂质体稳定表达 Vascular tissue engineering Tissue-type plasminog

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（30571838）

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为建立稳定表达组织型纤溶酶原激活因子（t-PA）基因的人脐静脉内皮细胞株，为其在基因修饰的组织工程血管中的应用奠定基础。首先构建t-PA基因的真核表达载体pcDNA3．1-Myc-HisB（-）／t-PA，将该表达载体用阳离子脂质体介导，转染人脐静脉内皮细胞系细胞，经G418筛选，获得阳性细胞克隆，扩增后分别用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫印迹（Western-blotting）检测t-PA转录和蛋白表达水平，用底物发色法检测t-PA的活性。逆转录聚合酶链反应检测出了t-PA的稳定转染细胞克隆，

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