【摘 要】
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目的培育具有G418抗性的HEK293细胞,用于建立猪内源性反转录病毒感染人HEK293细胞的模型.方法通过脂质体转染的方法,将含有neo基因的质粒pIRESneo导入HEK293细胞中,利用G418
【基金项目】
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国家社会公益研究专项资金 ( 2 0 0 1DIA40 0 36 );国家自然科学基金 ( 30 2 70 989);北京市自然科学基金 ( 5 0 32 0 15 7)
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目的培育具有G418抗性的HEK293细胞,用于建立猪内源性反转录病毒感染人HEK293细胞的模型.方法通过脂质体转染的方法,将含有neo基因的质粒pIRESneo导入HEK293细胞中,利用G418的选择特性,对转染细胞进行压力筛选,并对其进行了PCR鉴定.结果经600μg/ml的G418压力筛选后,获得了抗性细胞克隆.抗性细胞的形态和生长速度与筛选前细胞没有差异,特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA,可以扩增出对应的核苷酸片段.结论成功地培育了G418抗性HEK293细胞,为建立猪内源性反转录病毒
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