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念珠菌是深部真菌感染中最常见的菌属。是一群呈酵母样菌落的单细胞芽生真菌，广泛存在于自然界。随着医疗诊断方法技术的不断更新，真菌感染的患病率呈上升趋势，分析显示，念珠菌感染已成为重要的医院感染病源菌。由于患者往往有严重的基础疾病，并长期使用抗生素，条件致病性念珠菌感染病例不断增多，因而真菌治疗后的耐药问题日渐突出。我们对我院2年间住院病人、门诊病人标本分离的212株念珠菌菌种及药敏结果进行回顾分析，现报道如下：
1材料
1.1 标本来源 212株念珠菌来自2010年1月至2011年12月我院门诊和住院的感染患者的各类标本中。
1.2仪器 鑫科细菌鉴定/药敏全自动微生物分折仪，山东鑫科生物科技股份有限公司制造。
1.3试剂 山东鑫科生物科技有限公司配套产品，念珠菌显色培养基（郑州安图生物公司提供），8种抗真菌药物：两性霉素B、5-氟胞嘧啶、氟康唑、酮康唑、咪康唑、制霉菌素、伊曲霉素、特比萘芬（山东鑫科生物股份有限公司）。
1.4质控菌株 白色念珠菌ATCC 90029，购自卫生部临检中心。氟康唑可接受的抑菌环直径范围为28～39 mm。
2方法
2.1细菌分离 鉴定按《全国临床检验操作规程》进行培养分离，分离所得念珠菌采用念珠菌显色培养基或用山东鑫科真菌鉴定生化仪鉴定到种的水平。
2.2细菌药敏试验 采用2003年美国国家临床试验标准化委员会（NCCLS）认可的酵母菌纸片扩散法进行敏感性试验。Mueller-Hinton（MH）琼脂中补充2%葡萄糖和0.5mg/L美蓝。酵母菌在无菌生理盐水中稀释，比浊至0.5号麦氏管浊度，酵母菌量约为1×106～5×106/ml，均匀的涂抹在4mm厚平皿培养基上，贴上药敏纸片后，放置35℃孵箱，24小时判断结果。质控菌株同时进行K-B法药敏试验，结果符合CLSI质控要求
3结果
3.1念珠菌分布的科室构成 212株念珠菌分布在10多个科室，以内科系统为主，共分离出149株（占70.47%）;外科系统分离出30株（占14.16%）。念珠菌的感染来自临床各类标本。其中以痰标本为主，分离出株（占76.39%）;生殖系分泌物分离出11株（占5.25%）;尿分离出4株（占1.89%）;口腔分泌物分离出5株（占2.71%）;其它标本分离出29株（占13.76%）。
3.2 212株念珠菌的种类和对抗真菌药物的药敏结果
白色念珠菌在念珠菌感染中分离率最高，分离出121株（占57.07%）;其次为热带念珠菌，分离出46株（占30.80%）;光滑念珠菌分离出19株（占（12.6%）。药敏结果中：两性霉素B、制霉菌素均有90%以上的敏感率，特比萘芬、对白色念珠菌的敏感率仅6.3%，但对热带念珠菌的敏感率为100%。
4讨论
4.1念珠菌的感染特性 念珠菌是一群呈酵母样菌落的单细胞芽生真菌，广泛存在于自然界，通常不致病，是一类重要的机会致病菌。近年来，由于诊疗新技术新方法的推广使用，抗牛素药物尤其是广谱高效的抗生素、糖皮质激素、免疫抑制剂等的广泛应用，以及老龄患者、基础疾病危重患者等免疫低下患者的增多，真菌感染的患病率呈上升趋势。分析显示，念珠菌感染已成为重要的医院感染病源菌。真菌感染中白色念珠菌一直是最常见的病源菌，但近年来白色念珠菌的检出率逐年降低，而非白色念珠菌的检出率在逐渐上升，各菌种构成比发生重大变化。有学者报道热带念珠菌跃居第1位，其次是白念珠菌和光滑念珠菌。本文观察略有不同，白色念珠茼仍为主要流行菌，，其次为热带念珠菌（30.80%）、光滑念珠茵（12.6%），但和国内报道相比，构成比已发生明显变化。这可能与近年来临床上把唑类抗真菌药物尤其是氟康唑广泛地用于预防真菌感染有关，也可能与观察对象、地域不同有关，有待进一步观察。
调查表明念珠菌感染的患者主要分布在呼吸、血液、ICU、消化等内科科室及儿科，尤其是呼吸科患者念珠菌感染最多，原因可能是该病区的患者多为长期患病的老年人。老年人由于胸腺逐渐退化，T细胞减少，生理防御能力减退和组织器官萎缩等各方面的原因，易患感染性疾病，加上第三代头孢菌素、激素和细胞药物的使用，易引起念珠菌感染。其次是血液、消化、内科监护室、干部病房、儿科，主要是由于体弱、免疫力低下、病情较重，长期反复使用多种抗生素等因素，導致体内微生态的平衡紊乱，造成菌群失调，使真菌大量繁殖。
各种临床标本中，痰液标本检出率最高，事实上痰液的细菌检测多为混合型感染，由于正常人的上呼吸道也存在少量的真菌，使检出率大于感染率。故我们应重视真菌的镜检规范化，告知患者正确的留取痰液的方法。白色念珠菌是最常见的临床分离菌，其次为光滑念珠菌和热带念珠菌。
4.2念珠菌的耐药特性
212株念珠菌对7种常用抗真菌药物的敏感试验结果表明，制霉菌素、两性霉素-B、伊曲康唑、氟康唑对念珠菌比较敏感，它们的毒副作用依次为制霉菌素>两性霉素>伊曲康唑>氟康唑，传统的两性霉素B、制霉菌素均有90%以上的敏感率，可作为治疗念珠菌感染的常用药物。两性霉素B抗菌谱广，但副作用较大，故用药过程中要严密观察其肾毒性。氟康唑耐药率4.23，因其抗菌谱广、毒性低、半衰期长，临床上仍在广泛使用。传统的AMB仍有较高的敏感度（95.07），可作为严重念珠菌感染特别是全身感染者的首选，但其不良反应较大，在使用过程中应注意其不良反应。抗真菌药的类型不同，对不同种真菌的体外抗菌活性有较大的差异。新一代三唑类抗真菌药物伏立康唑未发现耐药株，只观察到2株剂量依赖株，因其对念珠菌的高度敏感和临床上较高的安全性，建议临床推广使用。综上所述，控制念珠菌医院感染应引起高度重视，尤其应加强对存在高危闪素患者的念珠菌感染预防工作。不同念珠菌对抗真菌药物的敏感性存在差异。由于深部念珠菌感染大多发生于免疫受损患者或有严重基础疾病患者，进展迅速，需要及时进行抗真菌治疗，而抗真菌治疗是一个相对较长的过程，在治疗的过程中可能产生耐药性。因此，应加强念珠菌耐药监测，为临床及时选择敏感药物、观察疗效提供帮助，以达到准确、有效治疗念珠菌感染的目的。
1材料
1.1 标本来源 212株念珠菌来自2010年1月至2011年12月我院门诊和住院的感染患者的各类标本中。
1.2仪器 鑫科细菌鉴定/药敏全自动微生物分折仪，山东鑫科生物科技股份有限公司制造。
1.3试剂 山东鑫科生物科技有限公司配套产品，念珠菌显色培养基（郑州安图生物公司提供），8种抗真菌药物：两性霉素B、5-氟胞嘧啶、氟康唑、酮康唑、咪康唑、制霉菌素、伊曲霉素、特比萘芬（山东鑫科生物股份有限公司）。
1.4质控菌株 白色念珠菌ATCC 90029，购自卫生部临检中心。氟康唑可接受的抑菌环直径范围为28～39 mm。
2方法
2.1细菌分离 鉴定按《全国临床检验操作规程》进行培养分离，分离所得念珠菌采用念珠菌显色培养基或用山东鑫科真菌鉴定生化仪鉴定到种的水平。
2.2细菌药敏试验 采用2003年美国国家临床试验标准化委员会（NCCLS）认可的酵母菌纸片扩散法进行敏感性试验。Mueller-Hinton（MH）琼脂中补充2%葡萄糖和0.5mg/L美蓝。酵母菌在无菌生理盐水中稀释，比浊至0.5号麦氏管浊度，酵母菌量约为1×106～5×106/ml，均匀的涂抹在4mm厚平皿培养基上，贴上药敏纸片后，放置35℃孵箱，24小时判断结果。质控菌株同时进行K-B法药敏试验，结果符合CLSI质控要求
3结果
3.1念珠菌分布的科室构成 212株念珠菌分布在10多个科室，以内科系统为主，共分离出149株（占70.47%）;外科系统分离出30株（占14.16%）。念珠菌的感染来自临床各类标本。其中以痰标本为主，分离出株（占76.39%）;生殖系分泌物分离出11株（占5.25%）;尿分离出4株（占1.89%）;口腔分泌物分离出5株（占2.71%）;其它标本分离出29株（占13.76%）。
3.2 212株念珠菌的种类和对抗真菌药物的药敏结果
白色念珠菌在念珠菌感染中分离率最高，分离出121株（占57.07%）;其次为热带念珠菌，分离出46株（占30.80%）;光滑念珠菌分离出19株（占（12.6%）。药敏结果中：两性霉素B、制霉菌素均有90%以上的敏感率，特比萘芬、对白色念珠菌的敏感率仅6.3%，但对热带念珠菌的敏感率为100%。
4讨论
4.1念珠菌的感染特性 念珠菌是一群呈酵母样菌落的单细胞芽生真菌，广泛存在于自然界，通常不致病，是一类重要的机会致病菌。近年来，由于诊疗新技术新方法的推广使用，抗牛素药物尤其是广谱高效的抗生素、糖皮质激素、免疫抑制剂等的广泛应用，以及老龄患者、基础疾病危重患者等免疫低下患者的增多，真菌感染的患病率呈上升趋势。分析显示，念珠菌感染已成为重要的医院感染病源菌。真菌感染中白色念珠菌一直是最常见的病源菌，但近年来白色念珠菌的检出率逐年降低，而非白色念珠菌的检出率在逐渐上升，各菌种构成比发生重大变化。有学者报道热带念珠菌跃居第1位，其次是白念珠菌和光滑念珠菌。本文观察略有不同，白色念珠茼仍为主要流行菌，，其次为热带念珠菌（30.80%）、光滑念珠茵（12.6%），但和国内报道相比，构成比已发生明显变化。这可能与近年来临床上把唑类抗真菌药物尤其是氟康唑广泛地用于预防真菌感染有关，也可能与观察对象、地域不同有关，有待进一步观察。
调查表明念珠菌感染的患者主要分布在呼吸、血液、ICU、消化等内科科室及儿科，尤其是呼吸科患者念珠菌感染最多，原因可能是该病区的患者多为长期患病的老年人。老年人由于胸腺逐渐退化，T细胞减少，生理防御能力减退和组织器官萎缩等各方面的原因，易患感染性疾病，加上第三代头孢菌素、激素和细胞药物的使用，易引起念珠菌感染。其次是血液、消化、内科监护室、干部病房、儿科，主要是由于体弱、免疫力低下、病情较重，长期反复使用多种抗生素等因素，導致体内微生态的平衡紊乱，造成菌群失调，使真菌大量繁殖。
各种临床标本中，痰液标本检出率最高，事实上痰液的细菌检测多为混合型感染，由于正常人的上呼吸道也存在少量的真菌，使检出率大于感染率。故我们应重视真菌的镜检规范化，告知患者正确的留取痰液的方法。白色念珠菌是最常见的临床分离菌，其次为光滑念珠菌和热带念珠菌。
4.2念珠菌的耐药特性
212株念珠菌对7种常用抗真菌药物的敏感试验结果表明，制霉菌素、两性霉素-B、伊曲康唑、氟康唑对念珠菌比较敏感，它们的毒副作用依次为制霉菌素>两性霉素>伊曲康唑>氟康唑，传统的两性霉素B、制霉菌素均有90%以上的敏感率，可作为治疗念珠菌感染的常用药物。两性霉素B抗菌谱广，但副作用较大，故用药过程中要严密观察其肾毒性。氟康唑耐药率4.23，因其抗菌谱广、毒性低、半衰期长，临床上仍在广泛使用。传统的AMB仍有较高的敏感度（95.07），可作为严重念珠菌感染特别是全身感染者的首选，但其不良反应较大，在使用过程中应注意其不良反应。抗真菌药的类型不同，对不同种真菌的体外抗菌活性有较大的差异。新一代三唑类抗真菌药物伏立康唑未发现耐药株，只观察到2株剂量依赖株，因其对念珠菌的高度敏感和临床上较高的安全性，建议临床推广使用。综上所述，控制念珠菌医院感染应引起高度重视，尤其应加强对存在高危闪素患者的念珠菌感染预防工作。不同念珠菌对抗真菌药物的敏感性存在差异。由于深部念珠菌感染大多发生于免疫受损患者或有严重基础疾病患者，进展迅速，需要及时进行抗真菌治疗，而抗真菌治疗是一个相对较长的过程，在治疗的过程中可能产生耐药性。因此，应加强念珠菌耐药监测，为临床及时选择敏感药物、观察疗效提供帮助，以达到准确、有效治疗念珠菌感染的目的。