【摘 要】
：
目的克隆人源抗菌肽(Antimicrobial peptide,AMP)LL-37及其改良体串联体基因,原核表达并纯化重组蛋白。方法利用生物信息学手段,对人源抗菌肽LL-37基因序列进行改良设计,合成
【机 构】
：
兰州大学基础医学院生物化学与分子生物学研究所; 甘肃省平凉市中医院;
论文部分内容阅读
目的克隆人源抗菌肽(Antimicrobial peptide,AMP)LL-37及其改良体串联体基因,原核表达并纯化重组蛋白。方法利用生物信息学手段,对人源抗菌肽LL-37基因序列进行改良设计,合成人源抗菌肽LL-37及其改良体基因片段,经重叠延伸PCR获得人源抗菌肽LL-37及其改良体串联体基因,克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-28a-dLL-37,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达,Tricine SDS-PAGE分析重组蛋白的表达形式,镍金属螯合亲和层析纯化重组蛋白。结果改良后的人源抗菌肽LL-37的等电点、稳定性及其在大肠杆菌中的半衰期均显著提高;重组表达质粒pET-28a-dLL-37经测序鉴定构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为11 000,主要以包涵体形式存在;纯化的重组蛋白纯度可达95%,浓度为0.473 mg/ml。结论已成功在大肠杆菌中表达并纯化了人源抗菌肽LL-37及其改良体串联体,为其后续生物学活性的研究奠定了基础。
其他文献
<正>靖边跑驴在清代就很盛行,是靖边县民俗社火中的一种歌舞表演形式,流传在陕西省榆林市靖边县宁条梁镇、东坑镇、镇靖乡等乡镇,尤其是在东坑镇流传时间最为久远,当地的表演
随着机器视觉技术的蓬勃发展,手势识别技术以其便捷的肢体语言交流方式在人机交互中发挥着越来越重要的作用,受到广大人机交互研究者的热爱。得益于手势识别技术的日益成熟,以手势为交互工具的智能教育、智能医疗、智能社保等智能系统逐渐普及到人们日常生活中。因此本文基于语义柔性映射交互模型构建了手势数据库,然而在利用卷积神经网络手势模型实际应用过程中,存在一些易混淆的手势,这些手势的存在必然会降低整个系统的性能
目的探讨急性心肌梗死患者介入治疗院内延迟的影响因素。方法回顾性分析2015年1月~2017年8月在北京天坛医院经急诊入院行经皮冠状动脉介入(PCI)治疗的324例急性ST段抬高型心
传统的人工干清圈工艺由于高成本、低效率已难适应大型规模化猪场的技术工艺需求,水泡粪和机械干清圈工艺逐渐成为规模化猪场的主流清圈工艺。文章就规模化猪场机械干清粪与
随着大众对健康饮食越来越关注,越来越多的电视台都想在饮食节目中分得一杯羹,那么如何才能占有一定的市场份额,满足观众需求,将节目做好,就显得尤为重要。而主持人的主持风
随着网络分析方法的发展,利用社团检测和社交网络分析研究世界贸易网络成为当前重要的前沿问题。但目前国内外的研究多为短期尺度,中长期尺度研究亟需更新。当前世界经济发展
<正>目的探讨超声引导下射频消融治疗小儿甲状腺功能亢进的可行性及安全性。方法选取2013年9月至2015年4月在我院行超声引导下射频消融治疗甲状腺功能亢进的小儿15例(男5例,
安静是一种良好的行为习惯,尤其是培养初中生养成安静的习惯尤为重要。积一千,累一万,不如养成个好习惯。创建安静的学习氛围,让每个学生安静下来,是最好的读书环境。这是教
中国特色农业现代化就是实现科学化、信息化、机械化、标准化、水利化、产业化、生态化、专业合作化(八化)过程,中国特色农业现代化模式=日本和荷兰型+美国和加拿大型+以色列
本文对农村供电所管理过程中线损的降低进行了深入的分析,指出了引起线损的原因以及解决线损的有效解决措施。