【摘 要】
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根据GenBank中Dermadistinctin K（DDK）和Dermadistinctin L（DDL）的氨基酸序列,选择大肠杆菌偏嗜性密码子,采用SOE法合成了DDK和DDL基因。在DDK及DDL基因序列中引入肠激酶裂解位点
【基金项目】
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湖南省教育厅科技科研项目(06C406);湖南省科技厅科技科研项目(06FJ4101)
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根据GenBank中Dermadistinctin K（DDK）和Dermadistinctin L（DDL）的氨基酸序列,选择大肠杆菌偏嗜性密码子,采用SOE法合成了DDK和DDL基因。在DDK及DDL基因序列中引入肠激酶裂解位点,并将其依次克隆入pET-32a（＋）质粒,构建了串联体融合表达载体P-DDK,并将其转入Rosetta（DE3）中进行融合表达 表达产物在终浓度为0.1 mmol/LIPTG诱导4 h后可达到最大表达量。对重组蛋白DDK进行镍离子亲和层析柱纯化以及肠激酶裂解之后,对酶切产物进
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