调控橡胶树法尼基焦磷酸合酶基因转录因子的初步筛选

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为研究橡胶树中法尼基焦磷酸合酶基因(HbFPS)的表达调控机制,采用酵母单杂交技术筛选了胶乳中与Hb FPS启动子结合的蛋白因子.将HbFPS启动子与报告质粒pHIS2.1连接构建诱饵质粒pHis-FPS,经筛选确定抑制背景表达的3-氨基三唑(3-aminotriazole,3-AT)浓度为10 mmol/L.同时以橡胶树胶乳mRNA为模板合成双链cDNA,并将双链cDNA、线性化的pGADT7Rec2载体和诱饵质粒pHis-FPS共同转化酵母菌株Y187,两载体共转化效率为1.7×106 cf
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