【摘 要】
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目的:构建pEGFP-HPV16E7表达载体,并观察其在肝癌细胞中的瞬时和稳定表达及小鼠肝癌细胞皮下成瘤情况,为建立表达HPV16E7的实体瘤动物模型奠定基础.方法:应用基因重组技术,构
【机 构】
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武汉大学医学院病毒学研究所分子生物学研究室武汉43007l
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目的:构建pEGFP-HPV16E7表达载体,并观察其在肝癌细胞中的瞬时和稳定表达及小鼠肝癌细胞皮下成瘤情况,为建立表达HPV16E7的实体瘤动物模型奠定基础.方法:应用基因重组技术,构建增强绿色荧光蛋白(EGFP)与HPV16E7的融合表达载体,经限制性内切酶酶切鉴定和PCR分析,用脂质体转染技术将其转入小鼠肝癌细胞,24 h 后RT-PCR检测HPV16E7 mRNA的生成,荧光显微镜观察EGFP-HPV16E7融合蛋白的表达,将转染细胞接种小鼠皮下,观察成瘤及成瘤后融合蛋白的表达情况.结果:酶切鉴定
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