【摘 要】
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分析了常规PCR扩增鉴定阳性克隆实验中存在的问题,进行了改进探索：反转录PCR（RT-PCR）获得目的基因片段,TA克隆连接质粒载体、转化大肠杆菌感受态细胞;利用目的基因的特异性引物,
【基金项目】
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安徽省教育厅教研项目（2008jyxm460）资助
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分析了常规PCR扩增鉴定阳性克隆实验中存在的问题,进行了改进探索：反转录PCR（RT-PCR）获得目的基因片段,TA克隆连接质粒载体、转化大肠杆菌感受态细胞;利用目的基因的特异性引物,用菌液PCR法直接筛选重组克隆,在筛选的阳性菌液中扩增到与目的基因片段大小一致的阳性条带,与质粒PCR及酶切的阳性对照一致,验证了菌液PCR具有可靠性。实验证明,自身引物菌液PCR法用于定性筛选重组阳性克隆,是一种简便、快速、有效的方法。
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