小鼠腺苷脱氨酶mRNA特异Ribozyme设计及其对靶RNA的切割作用

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选择小鼠腺苷脱氨酶mRNA做为靶RNA系统,采用计算机辅助设计,人工设计了能特异性定点切割小鼠腺苷脱氨酶mRNA的Ribozyme,命名为ADARb262、ADARb455, ADARb583和ADARb862,它们分别切割靶RNA上不同切点。通过计算机基因库检索,在已知小鼠基因中,无其它基因mRNA含有靶RNA切点两翼碱基序列的同源序列。经人工合成和体外转录得到了Ribozyme分子和靶RNA分子。体外切割实验表明,不同来源和不同切点的Ribozyme均能在相应切点定点切割靶RNA分子。Ribozyme和靶RNA侧翼序列部分影响了Ribozyme的切割活性。该研究可能为Ribozyme用于T淋巴细胞白血病的治疗和具有腺苷脱氨酶缺陷的重症联合免疫缺陷小鼠模型的建立提供新的手段。

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