人白细胞介素26的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

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克隆人白细胞介素-26(humaninterleukin-26,hIL-26)基因,构建高效稳定的大肠杆菌表达菌株。对GenBank上报道的hIL-26基因进行序列分析后设计合成引物,利用RT-PCR技术从人外周血单个核细胞(PBMC)总RNA中反转录并扩增得到人成熟肽IL-26基因。将得到的基因克隆到pMD18-T载体中,菌落PCR筛选、酶切鉴定并进行DNA序列分析。用BamHI和肪RI将目的片段切下,插入表达载体pBV220相应的位点。42℃热诱导表达目的蛋白,SDS—PAGE分析显示表达蛋白约占菌体
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