【摘 要】
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根据锤头状核酶的作用模式,设计、合成并克隆了特异性切割马铃薯卷叶病毒（Potato leaf roll virus,PLRV）中国分离株（PLRV-Ch）复制酶基因负链RNA的二价核酶序列。将该核酶基因克隆
【机 构】
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青岛农业大学农学与植保学院,内蒙古大学生命科学院,中国农业大学农业生物技术国家重点实验室
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根据锤头状核酶的作用模式,设计、合成并克隆了特异性切割马铃薯卷叶病毒（Potato leaf roll virus,PLRV）中国分离株（PLRV-Ch）复制酶基因负链RNA的二价核酶序列。将该核酶基因克隆到pGEM-4Z中,构建成体外转录载体pGEM-4ZDR;同时将包含核酶切割识别位点的PLRV-Ch复制酶基因cDNA近5＇端的874 bp片段反向插入到pGEM-4Z中,构建了体外转录载体pGEM-4ZR5。以线性化的重组质粒pGEM-4ZDR和pGEM-4ZR5为模板,在T7 RNA聚合酶的作用下,
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