【摘 要】
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目的：在大肠杆菌中表达并纯化人铜锌超氧化物歧化酶（HuSOD1）.方法：合成HuSOD1编码基因,PCR扩增后连入pMAL-p5x质粒构建融合表达载体,转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态,IPTG诱导表达,NBT
【机 构】
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沈阳药科大学,军事科学院军事医学研究院生物工程研究所
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目的：在大肠杆菌中表达并纯化人铜锌超氧化物歧化酶（HuSOD1）.方法：合成HuSOD1编码基因,PCR扩增后连入pMAL-p5x质粒构建融合表达载体,转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态,IPTG诱导表达,NBT法测定HuSOD1酶活,利用麦芽糖结合蛋白亲和层析柱纯化MBP-HuSOD1融合蛋白,经因子Ⅹa酶切及分子筛柱层析纯化HuSOD1蛋白.结果：构建了pMAL-p5x-HuSOD1表达载体,在大肠杆菌中实现了高表达,目的蛋白占全菌蛋白的30%,其中可溶性表达占63%,具有超氧化物歧化酶活性;通过亲
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