大鼠股骨、胫骨生长板软骨细胞的分离培养及鉴定

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目的探索一种简便可靠的大鼠生长板软骨细胞分离、培养、鉴定的方法.方法解剖大鼠胫骨及股骨生长板软骨,二步酶消法体外分离获得生长板软骨细胞进行培养,分别利用倒置相差显微镜及Ⅱ型胶原免疫荧光实验对软骨细胞进行形态学观察和鉴定.结果经过二步酶消法获得高纯度软骨细胞,倒置相差显微镜下可观察到软骨细胞贴壁生长的过程,第6天时90%软骨细胞融合,连接成"铺路石"样结构,细胞经Ⅱ型胶原免疫荧光染色显示强阳性.结论实验成功建立了生长板软骨细胞体外分离培养及鉴定体系,减少了实验中大鼠的使用数量并缩短了实验
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