ERCC1基因与卵巢上皮癌细胞铂类耐药相关性探讨

来源 :中国实用妇科与产科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:snowshine1116131
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目的检测切除修复交叉互补1(ERCC1)基因在人卵巢上皮癌顺铂(DDP)耐药细胞株SKOV3/DDP及其亲本细胞株SKOV3中的表达,探讨ERCC1基因在卵巢上皮癌顺铂耐药中的意义以及有效沉默ERCC1基因能否有效逆转SKOV3/DDP细胞对DDP耐药。方法于2013—2014年在南方医科大学采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western印迹法检测ERCC1 m RNA和蛋白在SKOV3/DDP及SKOV3细胞中的表达。人工构建3个靶向沉默ERCC1基因的短发夹状RNA(sh RNA)质粒表达载体,慢病毒载体法转染至SKOV3/DDP细胞,RT-PCR和Western印迹法检测ERCC1基因水平并挑选沉默效果最佳的表达载体。RT-PCR和Western印迹法检测稳定转染后SKOV3/DDP细胞中ERCC1基因的表达,CCK-8法检测转染细胞对DDP的耐药性。结果 SKOV3/DDP细胞中ERCC1 m RNA和蛋白的表达量明显高于SKOV3,差异有统计学意义(P<0.01)。稳定转染ERCC1 sh RNA后的SKOV3/DDP细胞,ERCC1的m RNA及蛋白的表达量明显下降,差异有统计学意义(P<0.01)。细胞活性检测提示特异性沉默ERCC1基因能增加SKOV3/DDP细胞对顺铂的敏感性(P<0.05)。结论 ERCC1基因在SKOV3/DDP细胞中的表达明显升高,有效沉默ERCC1基因能有效逆转SKOV3/DDP细胞对DDP耐药,增加卵巢上皮癌DDP耐药细胞对DDP的敏感性,为卵巢上皮癌耐药的治疗提供新靶点。
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