【摘 要】
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目的研究肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-alpha，TNF-α）对喉黏膜间充质干细胞（laryngeal mucosa mesenchymal stromal cell，LM-MSC）免疫调节能力的影响及其潜在的分子机制。方法2017年4月至2018年3月，取喉癌全切手术患者组织标本中的正常喉黏膜组织，通过酶消化法分离培养LM-MSC。通过LM-MSC细胞与T细胞体外直
【机 构】
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空军军医大学西京医院耳鼻咽喉头颈外科，西安 710032,空军军医大学组织工程中心，西安 710032,空军军医大学组织工程中心，西安 710032,空军军医大学西京医院耳鼻咽喉头颈外科，西安 710
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目的研究肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-alpha，TNF-α）对喉黏膜间充质干细胞（laryngeal mucosa mesenchymal stromal cell，LM-MSC）免疫调节能力的影响及其潜在的分子机制。
方法2017年4月至2018年3月，取喉癌全切手术患者组织标本中的正常喉黏膜组织，通过酶消化法分离培养LM-MSC。通过LM-MSC细胞与T细胞体外直接共培养模型，检测LM-MSC的免疫调节能力。通过炎症因子TNF-α长期刺激在体外模拟慢性炎症模型，比较正常与慢性刺激后的LM-MSC免疫调节能力的差异。通过Western blot和实时定量反转录PCR（RT-qPCR）等方法检测正常与TNF-α慢性刺激后的LM-MSC表观遗传基因组蛋白乙酰基转移酶复合体（general control non-repressed protein5，GCN5）的表达差异。采用SPSS 17.0统计学软件对数据进行统计分析。
结果在炎症因子TNF-α慢性作用下，与对照组（设为1）相比，GCN5的RNA相对表达量为0.31±0.03（3 d）和0.53±0.06（7 d），差异有统计学意义（F=13.45，P<0.05），LM-MSC诱导T细胞凋亡率低于对照组，差异有统计学意义[6.27%±0.81%（3 d）和4.99%±0.52%（7 d）比10.02%±1.02%，F=11.13，P<0.05]。并且LM-MSC诱导T细胞凋亡的能力受到GCN5的调节。在TNF-α的慢性炎症刺激后，FAS/FASL与GCN5表达水平一致，并且随着GCN5的变化而变化。
结论TNF-α慢性刺激后，LM-MSC中GCN5的表达降低，从而使得其免疫调节能力受损。
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