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目的 了解大肠埃希菌临床菌株超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因及其携带模式、β-内酰胺类抗生素诱导以及组氨酸激酶抑制剂抑制细菌蛋白磷酸化和ESBLs基因表达的作用机制.方法 采用PCR和测序法确定大肠埃希菌主要ESBLs基因(KPC、TEM、SHV、CTX-M)及其携带模式.采用E-test和微量试管稀释法分别测定最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC).采用固定化金属螯合层析法、细菌蛋白磷酸化检测试剂盒及实时荧光定量RT-PCR分别检测1/4 MIC青霉素和头孢噻肟诱导或组氨酸激酶抑制剂(氯氰碘柳胺、自行设计的溴化或碘化甲基咪唑)抑制大肠埃希菌耐药菌株蛋白磷酸化和ESBLs基因mRNA水平升高的作用.结果 183株β-内酰胺类抗生素耐药大肠埃希菌临床菌株中,TEM和CTX-M基因检出率(83.1％和77.1％)高于其他基因且以两者同时携带模式为主(65.0％)(P＜0.05).1/4 MIC青霉素和头孢噻肟钠能诱导大肠埃希菌耐药菌株蛋白磷酸化及TEM、SHV、CTX-M基因mRNA水平显著升高(P＜0.05).200 μmol氯氰碘柳胺、2或10μmol溴化甲基咪唑、20或50 μmol碘化甲基咪唑无抑制或杀灭大肠埃希菌的作用,但能抑制上述抗生素诱导的细菌蛋白磷酸化和ESBLs基因mRNA水平升高(P＜0.05),也能提高大肠埃希菌耐药菌株对青霉素和头孢噻肟的敏感性(P＜0.05).结论 TEM和CTX-M是本地区β-内酰胺类抗生素耐药大肠埃希菌临床菌株优势ESBLs基因,TEM+CTX-M是ESBLs基因优势携带模式.亚致死量β-内酰胺类抗生素可经TCSS上调大肠埃希菌ESBLs基因表达水平,但可被组氨酸激酶抑制剂所抑制。