抗胃癌鼠单抗3G9 Fab段基因的克隆及其在大肠杆菌的表达

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dawneagle
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本文报道用聚合酶链延伸反应(PCR)从分泌抗胃癌鼠单抗的杂交瘤细胞系3G9中克隆出了重链Fd段和k链的基因。DNA序列测定表明3G9的VH、D、JH分别属于VH7183、DFL16.1和JH3;Vk和Jk分别属于Vk Ⅱ和Jk2。将3G9 Fd段和k链cDNA克隆到表达载体pComb3中,在大肠杆菌中获得了表达,用还原和非还原的SDS-PAGE电泳作免疫印迹实验(western blotting),证明了Fab段的表达。并用酶联免疫过滤实验初步证明了大肠杆菌表达的3G9 Fab段具有特异性的抗原结合活性。

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