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根据副猪嗜血杆菌16S rRNA基因设计了一对引物，通过最佳条件摸索扩增出大小为821bp的特异目的基因片段，建立了快速检测副猪嗜血杆菌的PCR方法。该方法最低检出量达10^-3 ng，且对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、传染性胸膜肺炎放线杆菌和巴氏杆菌等均无交叉反应。用该PCR方法从门诊送检的病料中检测出4株副猪嗜血杆菌，并对分离株SH0854P的PCR扩增产物进行测序与对比分析，其与已发表的GenBank中的相关菌株的同源性为97．3％～100％。