印染废水中活的但非可培养状态细菌的发现①②

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【目的】探明印染废水生物反应器中活的非可培养(viable but non-culturable,VBNC)细菌及其系统关系。【方法】利用土质滤材构建生物反应器,基于复苏促进因子(resuscitation promoting factor,Rpf)对VBNC细菌的复苏刺激生长作用,采用最大可能数法(most probable number,MPN)及其MPN培养系判断样品中的细菌总数,稀释平板法分离其中复苏可培养化的VBNC菌株,解析16S rRNA基因系统关系。【结果】(1)MPN培养系中,处理组MPN值对应的细菌总数为9.3×106~2.4×108,大于对照组MPN值对应的细菌总数4.3×106~9.3×106,表明添加Rpf后可培养化细菌总数最高从每g样品的7.5×106提高到2.4×108;(2)添加Rpf可使样品中细菌分离丰度提高2.2~32倍,表明印染废水生物反应器中存在对Rpf敏感、复苏可培养化的VBNC优势菌群;(3)MPN培养系中处理组稀释段培养液的OD660值大于对照组的OD660值,表明Rpf对部分细菌菌种有生长刺激作用。【结论】利用复苏促进因子Rpf,探明了印染废水生物反应器中存在对Rpf敏感的VBNC菌种,包括放线菌、革兰氏阳性以及革兰氏阴性菌。本研究结果揭示了印染废水中存在大量活的但非可培养状态细菌,这将为其形成机理、复苏活性化机制以及印染废水深度处理工程工艺改进等方面的深入研究提供重要的思路与方法。
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