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目的 在大肠杆菌中重组表达犬钩虫抗凝肽AcaNAP8基因,并检测表达产物抗凝活性.方法 设计引物,将AcaNAP8成熟肽编码序列克隆、连接到原核表达载体pET32a,构建重组表达质粒;成功构建的重组表达质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达情况;诱导表达的重组蛋白用Ni亲和层析进行纯化;用凝血酶原时问(PT)和活化的部分凝血活酶时间(aPTTr)检测重组产物体外抗凝活性.结果 成功构建了pET32a/AcaNAP8原核表达重组质粒,在大肠杆菌中成功表达并获得了重组AcaNAP8,表达产物能明显延长PT及aPTT.结论 在大肠杆菌中成功表达了AcaNAP8融合蛋白,表达产物具有显著抗凝活性.该实验为进一步探讨AcaNAP8的作用机制及应用奠定了基础.