制备鳗弧菌(Vibrio anguillarum)全菌灭活疫苗,采用腹腔注射和浸泡两种方式分别免疫牙鲆(Paralichthys olivaceus),于免疫后0 h、4 h、8 h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h、7 d、14 d分别取牙鲆脾、头肾、鳃3种组织,提取mRNA,应用实时荧光定量PCR法检测3种组织中白介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)α、主要组织相容性复合体(MHC)MCHⅠ、MHCⅡ、T细胞表面受体CD4、T细胞表面受体CD8、免疫球蛋白(Ig)M 7种免疫相关基因的表达。结果显示,两种方式免疫后各基因表达量均出现显著上调。注射组3种组织中,IL-1β、TNFα基因的表达高峰出现时间在12~24 h,MHCⅠ、MHCⅡ、CD4、CD8的表达高峰出现在48~72 h,IgM的表达高峰出现在免疫后7 d,各基因表达量最高值是对照组的2~70倍;浸泡组3种组织中,IL-1β、TNFα基因的表达高峰出现在免疫后12~48 h,MHCⅠ、MHCⅡ、CD8表达高峰出现在48~96 h,但CD4在头肾和鳃中表达高峰出现在72 h,在脾中表达高峰出现在7 d,IgM在鳃中表达高峰出现在96 h,在脾和头肾中表达量在14 d内逐渐上升,各基因表达最高值是对照组的2~20倍。结果表明,注射组各组织基因的转录水平均高于浸泡组,且脾、头肾中表达量最高值出现时间早于浸泡组,但鳃中各基因峰值出现时间晚于浸泡组。研究结果为疫苗的免疫途径及免疫效果评价提供了基础数据。