猪流行性腹泻病毒安徽分离株N基因的克隆与表达

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[目的]克隆和表达猪流行性腹泻病毒(PEDV)的N基因。[方法]采用RT-PCR方法对PEDVFD株的N基因进行扩增,将扩增产物连接pET-28B载体,阳性质粒转入大肠杆菌BL21感受态细胞,诱导表达目的蛋白。[结果]PEDVFD株N基因序列全长为1326个核苷酸,编码441个氨基酸;重组N蛋白为可溶性表达,大小约58ku;Westernblot检测结果表明,重组N蛋白与PEDV抗体阳性血清发生特异性反应。[结论]该试验制备的PEDV重组N蛋白具有较好的免疫原性,可用于PEDV诊断方法的开发及相关研究。
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