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依据计量置换保留理论所得到的参数lgI，来测定不同构象态α-糜蛋白酶（α-chy）在两种不同高效疏水相互作用色谱（HPHIC）固定相表面的折叠自由能，发现脲变α-Chv在HPHIC固定相表面获取的折叠自由能比溶液中的高很多，不同HPHIC固定相表面为脲变α-Chv提供不同的折叠自由能，且都随变性剂脲浓度的增大而增大；通过对不同HPHIC色谱柱后复性α-Chv的比活测定，还发现脲变α-Chy的复性效率与其从固定相表面的折叠自由能有关，同一构象的α-Chy从固定相表面得到的折叠自由能越高越有利于其折叠成天然蛋