基因突变和转基因技术评价TLR—4信号受体在流体切应力诱导血管内皮细胞IL—8基因转录激活中的作用

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用基因突变和转基因技术,评价TLR-4信号受体在层流低切应力刺激诱导血管内皮细胞IL-8基因转录激活中的作用.RT-PCR、Northern杂交和免疫荧光细胞化学染色均显示脐静脉血管内皮细胞表达TLR-4,同时RT-PCR和Northern杂交显示,层流切应力刺激1 h后血管内皮细胞TLR-4表达增强.用RT-PCR技术从血管内皮细胞扩增出胞内区段缺失突变TLR-4 cDNA,用PCR技术从其基因组DNA中扩增出IL-8上游调控序列,分别克隆于真核表达质粒pcDNA3和绿色荧光增强蛋白报告基因pEGFP1
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