丝状真菌瑞氏木霉外源基因表达系统的构建

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：teiku

【摘要】

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采用PCR技术体外扩增获得了瑞氏木霉外切葡聚糖纤维二糖水解酶Ⅰ(CBHⅠ)启动子和终止子序列.并以大肠杆菌质粒pUC19为骨架,在该启动子和终止子序列间加入多克隆位点,构建了瑞

【作者】

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汪天虹吴志红刘世利曲音波

【机构】

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山东大学微生物技术国家重点实验室

【出处】

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中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

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2003年6期

【关键词】

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瑞氏木霉外源基因表达系统 cbhI启动子构建表达 Trichoderma reesei heterogeneous genes expression s

【基金项目】

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国家自然科学基金，山东省自然科学基金

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采用PCR技术体外扩增获得了瑞氏木霉外切葡聚糖纤维二糖水解酶Ⅰ(CBHⅠ)启动子和终止子序列.并以大肠杆菌质粒pUC19为骨架,在该启动子和终止子序列间加入多克隆位点,构建了瑞氏木霉强表达整合型载体pTRIL.以质粒pAN7-1为模板,体外扩增了带有潮霉素磷酸转移酶(hph)基因的DNA片段,将hph插入pTRIL的 cbh1启动子和终止子序列之间,构建了Pcbh1-hph-Tcbh1表达盒.用此表达盒转化瑞氏木霉C30原生质体,在潮霉素平板上得到15株抗性转化子.对其中的H1转化子进行了PCR和Sout

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