多重聚合酶链反应-微流芯片检测人血小板抗原系统基因型方法的建立与应用

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目的 建立人血小板抗原(HPA)-2、4、5系统基因型的检测方法.方法 用多重聚合酶链反应和微流芯片检测方法,通过设计9条特异性引物、优化反应体系和反应条件,在一个体系中同时扩增HPA-2、4、5系统特异性的目的基因片段,利用微流芯片快速检测HPA-2、4、5系统基因型;并把分型结果与采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)获得的结果进行比较.结果 对35名健康单采血小板者进行HPA-2、4、5系统分型的结果为:33名为2a/2a型,2名为2a/2b型;34名为4a/4a型,1名为4a/4b型;29名为5a/5a型,6名为5a/5b型.未发现2b/2b、4b/4b及5b/5b纯合子个体.该结果与PCR-SSP方法获得的结果完全一致.结论 该方法可快速、准确地用于血小板血型抗原基因分型,尤其适合于大样本检测.
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