重组AAV1／hFIX病毒制备及其体外转导培养细胞的实验研究

来源 :中国现代医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：idcwang

【摘要】

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目的制备携带人凝血因子IX基因的重组AAV1病毒（rAAV1／hFIX），体外转导C2C12细胞并检测hFIX的表达。方法通过“一株载体细胞／一株辅助病毒”的双因素包装策略制备出rAAV1／hFIX，体外转

【作者】

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彭建强郭莹吴小兵袁振华曹晖

【机构】

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湖南省人民医院心内科,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点试验室,国家863生物领域病毒基因载体研发基地

【出处】

：

中国现代医学杂志

【发表日期】

：

2008年18期

【关键词】

：

【基金项目】

：

“863”高科技发展计划基因治疗重大关键技术资助项目（No：863-BH03-05-02）

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目的制备携带人凝血因子IX基因的重组AAV1病毒（rAAV1／hFIX），体外转导C2C12细胞并检测hFIX的表达。方法通过“一株载体细胞／一株辅助病毒”的双因素包装策略制备出rAAV1／hFIX，体外转导C2C12细胞后，检测细胞上清中FIX的表达量。结果制备出了高纯度的rAAV1／hFIX病毒，转导C2C12细胞24h后在上清中即可检测到hFIX，连续检测了120h都有表达，24h最高表达量高达到（68．0±3．2）ng／24h。结论制备的rAAV1／hFIX病毒在体外培养细胞中能高水平表

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