为快速测定原料大豆的蔗糖指标,及时为调整豆制品生产工艺参数或原料配比提供数据支撑,以满足快速准确鉴定高蔗糖大豆育种新品系的需要,本研究建立基于混合样品集的大豆种子蔗糖含量近红外光谱定标模型.将天然和人工添加蔗糖的大豆样品结合起来作为混合参试样品集,先利用近红外光谱分析仪采集光谱数据,再通过酶比色法测定化学值,进行光谱数据预处理,采用偏最小二乘回归统计方法建立大豆蔗糖含量的近红外光谱定量分析模型,并利用未知蔗糖含量的大豆种子样品对模型的预测性能进行验证.以混合参试样品集建立的近红外光谱定标模型能够在较宽的蔗糖含量范围(37.83～139.35 g·kg-1)内获得较为精确的预测结果,并将二阶导数联合多元散射校正作为光谱数据的最佳预处理方法.经外部验证,样品的化学测定值与定标模型预测值极显著正相关,且决定系数达0.943,预测均方差为3.17,相对误差为5.923％.所建立近红外光谱定标模型的预测能力较强、适用性较好,能够有效应用于大豆种子蔗糖含量的快速准确测量.