生物素标记口蹄疫cDNA探针的研制与应用

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口蹄疫是害危严重的传染病,特别是在国际国内的畜产品贸易中,带毒动物和畜产品带毒的检测一直是难解决的问题。本研究是用乳兔繁殖的Asia-Ⅰ型病毒,经氯仿—异戍醇—PEG—DEAE纤维素层析的程序纯化病毒,并在纯化的病毒液中加入RNase和DNase水解宿主细胞核酸。用熏蒸饱和酚提取病毒核酸,同时加入氧化钒核苷复合物和RNasin,经无水乙醇和醋酸钠沉淀核酸,并用d(T)-纤维素进一步层析纯化FMDV-RNA。用提纯的RNA作为模板,oligo(dT)12—18作为引物,在反转录酶,dNTPs等成份存在的反转
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