【摘 要】
：
目的建立小鼠骨髓瘤NS0细胞DNA含量测定国家标准品。方法使用QIAGEN基因组DNA纯化试剂以及Genomic-tip 500/G制备了NS0细胞DNA作为标准物质原料。通过紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳进行纯度和含量测定,每支100μL分装于螺口冻存管。组织5个独立实验室应用紫外分光光度法对我国第一批NS0 DNA国家标准品进行协作标定,并评价DNA标准物质的稳定性与适用性。结果所制备的NS0
【机 构】
：
中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室
【基金项目】
：
国家科技重大专项资助项目（2018ZX09736016-007）；
论文部分内容阅读
目的建立小鼠骨髓瘤NS0细胞DNA含量测定国家标准品。方法使用QIAGEN基因组DNA纯化试剂以及Genomic-tip 500/G制备了NS0细胞DNA作为标准物质原料。通过紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳进行纯度和含量测定,每支100μL分装于螺口冻存管。组织5个独立实验室应用紫外分光光度法对我国第一批NS0 DNA国家标准品进行协作标定,并评价DNA标准物质的稳定性与适用性。结果所制备的NS0细胞DNA标准品经检测,A260/A280均在1.7～1.9之间,电泳图谱条带单一,纯度符合要求。该DNA标准品经5家实验室协作标定共90次,几何平均含量为87.5μg·mL-1,平均含量的95%可信区间为86.6～88.5μg·mL-1。短期稳定性实验表明,该标准品在4℃条件下放置4个月,DNA标准品浓度测定值及A260/A280无显著性差异;-20、-70℃贮存1年的长期稳定性结果显示,标准品DNA浓度测定值及A260/A280无显著性差异,电泳条带单一,因此该标准物质应在-20℃条件以下长期保存。在标准品适用性研究中,利用该标准品进行定量PCR法测定,在3 fg·μL-1～300 pg·μL-1之间线性良好,标准曲线r~2值＞0.999。结论该批NS0 DNA国家标准品各项指标均符合要求,可作为国家标准品用于定量PCR法检测NS0细胞DNA残留量,DNA标准品含量赋值为87.5μg·mL-1,批号为330002-201701。
其他文献
＜正＞ 在任何一门实验教学或实验研究工作中,误差问题是一个非常重要的问题,它始终以“量”的概念在整个教学或研究过程中体现出来,而且与实验教学或研究工作的全过程有着密切的联系。物理化学实验和其它实验研究工作一样,一方面要对实验方案进行分析研究,选择适当的测量方法进行数据的直接测量,另一方面还必须将所得数据加以整理归纳,以得到某些重要的经验规律。但由于仪器和感觉器官的限制,实验数据只能达到一定程度的准
乡村振兴和新型城镇化建设呈现出价值相通性、目标趋同性、主体一致性、政策共融性的特点。要素流动视角下，构建城乡互促共生的有机生命体必须协同推进乡村振兴战略与新型城镇化战略。乡村振兴和新型城镇化战略耦合内在动因源自于城乡要素渗流通道梗阻；价值范式为市场经济理性规则、政府有效政策供给与政策引导“双轮驱动”，载体依托为县域城镇化。乡村振兴和新型城镇化战略耦合的路径重构需要秉承系统治理理念，摒弃“碎片化”治
近几年,随着城市化进程快速发展,城市发展当中有一项很重要的组成部分就是市政给排水工程,这项工程也逐渐受到各界广大重视。相关部门一定要不断将给排污管道预制检查井的施工技术能力提高才能进一步确保工程项目施工质量和安全性,最后能进一步推动当今社会的健康稳定发展。通过更科学合理地使用市政工程排污管道预制检查井施工工艺,除了能够将城市雨水和污水的排放量提高以外,还能有效将人们的生活质量提高。所以,本文专门针
蒙古文铅活字印刷技术的发明给我国蒙古民族文化和教育的发展带来了非常深远的影响。活字印刷实现了批量化、规模化生产,大大降低了刻印成本、缩短了工作时间,提高了印刷效率。然而,受制于蒙古文铅印报纸图像标注数据集稀缺与数字化技术的不成熟,目前,蒙古文铅印报纸图书的保存方式仍以纸张形式和扫描图片形式为主,不利于它们的长期保存和开发利用。因此,如何将资料文献、报纸图书转录为电子文档以便于长期保留和二次挖掘成为
产教融合是中国“十三五”阶段促进经济社会协调发展的重要举措，为响应国家政策的号召，为地区经济社会发展提供所需的应用型人才，践行地方应用型本科教育的培养目标，探求地方应用型本科发展的正确道路，在地方应用型本科院校中发展校企协同育人项目，构建合适的校企协同育人模式。通过对应用型本科院校和企业实施协同育人的实际情况调研，剖析了校企协同育人的必要性，构建地方应用型本科校企协同育人模式应该以建立校企协同育人
浙江省从2020年开始实施医用耗材集中带量采购政策。该研究通过对医用耗材集中带量采购的主要做法、实施情况等方面进行介绍，提出了对浙江省医用耗材集中带量采购工作的若干思考，以期为浙江省及其他地区今后开展相关工作提供借鉴。
＜正＞微波或射频消融技术治疗乳腺良性疾病具有微创、并发症少等特点，受到乳腺外科临床医师广泛关注。为推动该技术在乳腺外科临床上的规范化应用，中华医学会外科学分会乳腺外科学组组织乳腺外科部分专家总结微波或射频消融技术治疗乳腺纤维腺瘤相关文献，结合我国国情提出共识性意见，旨在为临床医生合理选择微波或射频消融技术治疗乳腺纤维腺瘤提供参考。Delphi
在新课改全面深入的今天,教师在初中体育教学实践中,应该充分全面突出学生的主体性地位,巧妙运用学生的体育心理规律,以此来达到体育教学事半功倍的目的。在初中体育教学实践中,教师应该精确分析学生的体育心理规律,科学运用教学策略,不断提升学生的体育素养。
以金叶复叶槭、红叶榆叶梅、金叶榆和紫叶李4种彩叶树种为研究材料，对其在春季转色期的光合色素含量、花色素苷、叶色参数以及细胞液p H值进行了测定分析。结果表明：叶片光合色素含量方面，红叶树种整体色素含量水平均高于2种金叶树种，且二者叶绿素与类胡萝卜素整体含量随时间推移呈现出较为规律的高—低—高变化，金叶树种变化不显著。金叶树种花色素苷含量一直处于平缓下降趋势，而红叶树种花色素苷含量整体呈高—低—高—