人Delta-like4^ext -93-217原核表达、纯化及蛋白活性检测

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hbimac
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目的:原核表达、纯化融合蛋白TRX/hDⅡ^ext-93—217,并对其活性进行检测.方法:采用PCR方法扩增TRX/hDⅡ^ext-93-217多核苷酸序列,克隆入pMD18T载体.测序正确后,将其亚克隆人pET32a(+)原核表达载体,获得pET32a(+)-hDⅡ^ext-93-217载体.以该载体转化E.coli菌株BL21,IPTG诱导其表达.以镍离子螯合柱纯化目的蛋白,采用SDS—PAGE,Western Blot方法鉴定目的蛋白的表达;采用萤光素酶报告基因系统检测目的蛋白活性.结果:通过PC
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