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单重靶向条件复制型腺病毒穿梭载体pshuttle-E1A-E1Bp-E1B55K的构建及鉴定

来源 :吉林大学学报：医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lmail

【摘 要】

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目的：构建并鉴定一种新型E1A基因CR2区选择性缺失的腺病毒穿梭载体pshuttle-E1A-E1Bp-E1B55K,为包装单重靶向条件复制型腺病毒进行肿瘤基因治疗奠定基础。方法：采用RT-PCR法从

【作 者】

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王宏芳 李金华 刘扬 李艳博 王志成 刘威武 龚守良 

【机 构】

：

吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室

【出 处】

：

吉林大学学报：医学版

【发表日期】

：

2010年5期

【关键词】

：

条件复制型腺病毒 穿梭载体 E1A基因 conditionally replicative adenovirusshuttle vector E1A gene 

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助课题（30870747,30970681）

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目的：构建并鉴定一种新型E1A基因CR2区选择性缺失的腺病毒穿梭载体pshuttle-E1A-E1Bp-E1B55K,为包装单重靶向条件复制型腺病毒进行肿瘤基因治疗奠定基础。方法：采用RT-PCR法从人胚肾细胞（293T）中扩增条件复制型腺病毒必需的E1区基因,包括E1A、E1Bp及E1B55K基因片段;重叠PCR法扩增CR2区缺失的E1A基因;采用基因重组技术构建pshuttle-E1A-E1Bp-E1B55K重组质粒,并进行PCR及酶切鉴定。结果：经测序证实获得的E1B55K及CR2区缺失的E1A基因

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