【摘 要】
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目的建立检测沙门菌耐药基因的多重PCR方法。方法在已有的单一PCR检测沙门菌耐药基因的基础上,采用正交试验设计法,对Mg2+、dNTPs和引物浓度比例以及退火温度进行优化,确定沙
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目的建立检测沙门菌耐药基因的多重PCR方法。方法在已有的单一PCR检测沙门菌耐药基因的基础上,采用正交试验设计法,对Mg2+、dNTPs和引物浓度比例以及退火温度进行优化,确定沙门菌耐药基因多重PCR最佳反应体系和条件,并运用多重和单一PCR同步比较检测细菌耐药基因。结果成功建立了氨基糖苷类药物耐药基因aph(3)-IIa、aadA2、aacC4三重PCR方法、氯霉素类药物耐药基因flor、cmlA和catI三重PCR方法、四环素类药物耐药基因tetA和tetB二重PCR方法,且多重和单一PCR同步检测相关耐药基因结果符合率达100%。结论建立的多重PCR具有特异、快速、简便的特点,可为沙门菌耐药基因的检测以及耐药性的监控提供技术支撑。
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